?血型抗體效價(jià)測(cè)定
?目的?了解血型抗體效價(jià)測(cè)定的操作方法。
?原理?將被檢抗血清作倍比稀釋后,加入一定量的抗原紅細(xì)胞,觀察凝集強(qiáng)度。以抗體稀釋后仍能與抗原紅細(xì)胞出現(xiàn)1個(gè)(+)凝集的試管稀釋倍數(shù)之倒數(shù)定為該抗體的效價(jià)。器材小試管、刻度吸管、37°C水浴箱。
試劑1.標(biāo)準(zhǔn)2%A型紅細(xì)胞生理鹽水懸液。
?生理鹽水。
?標(biāo)本被檢者血清。
?操作以抗A效價(jià)測(cè)定為例。
?1.血清倍比稀釋取10支小試管,每管加入生理鹽水0.1ml。在第1管中加入0.1ml被檢者血清,混勻后吸取0.1ml加入第2管,依此類推,至第10管,最后棄去0.1ml。
?2.加入抗原紅細(xì)胞于每管中加入2%A型紅細(xì)胞生理鹽水懸液0.1ml,混勻。
?3.溫育置15~20°C室溫中溫育15min。
?4.離心和觀察結(jié)果,以1000r/min離心1min,以出現(xiàn)1個(gè)(+)凝集強(qiáng)度試管的血清稀釋倍數(shù)的倒數(shù)定為該抗血清效價(jià)。
?注意事項(xiàng)
?1.倍比稀釋要準(zhǔn)確,避免稀釋不勻出現(xiàn)跳管現(xiàn)象。
?2.離心后試管內(nèi)上清液出現(xiàn)溶血,表明不僅有抗原抗體反應(yīng),而且有補(bǔ)體激活,具有重要臨床意義。