進行胃蛋白酶原的檢測,主要的意義是判斷是否正常,因為胃蛋白酶原忽高忽低,會影響到正常消化功能以及正常腸胃功能,對個人的身體造成的傷害相當大,所以在平時一定要注意,根據(jù)個人自身的情況選擇治療方法,檢測方法,才能夠判斷出目前的病理狀態(tài)。
測試方法取試管6支,其中3支各精密加入對照品溶液1ml,另3支各精密加入供試品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保溫5分鐘,精密加入預熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5ml,搖勻,并準確計時,在37℃±0.5℃水浴中反應10分鐘。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,搖勻,濾過,取續(xù)濾液備用。另取試管2支,各精密加入血紅蛋白試液5ml,置37℃±0.5℃水浴中保濕10分鐘,
再精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,其中1支加供試品溶液1ml,另1支加上述鹽酸溶液1ml,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,分別作為供試品和對照品的空白對照,照分光光度法(附錄ⅣA)在275nm的波長處測定吸收度,算出平均值AS和A,按下式計算。
A×Ws×n 每1g含蛋白酶活力(單位)=As×W×10×181.19式中 AS為對照品的平均吸收度;A為供試品的平均吸收度;Ws為對照品溶液每1ml中含酪氨酸的量,μg;W為供試品取樣量,g;n為供試品稀釋倍數(shù)。
在上述條件下,每分鐘能催化水解血紅蛋白生成1μmol酪氨酸的酶量,為一個蛋白酶活力單位。
實驗室方法名稱: 胃蛋白酶的測定-胃蛋白酶測定法
應用范圍: 本方法采用胃蛋白酶測定法測定胃蛋白酶的效價。
本方法適用于胃蛋白酶。
方法原理: 精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價。
試劑: 1. 血紅蛋白試液
2. 三氟醋酸溶液
3. 鹽酸溶液
儀器設備: 可見分光光度計
試樣制備: 1. 供試品溶液的制備
精密稱取本品適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.2-0.4個單位的溶液,作為供試品溶液。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取酪氨酸對照品適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。
注:"精密稱取"系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一。"精密量取"系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。