進(jìn)行胃蛋白酶原的檢測,主要的意義是判斷是否正常,因?yàn)槲傅鞍酌冈龈吆龅?,?huì)影響到正常消化功能以及正常腸胃功能,對個(gè)人的身體造成的傷害相當(dāng)大,所以在平時(shí)一定要注意,根據(jù)個(gè)人自身的情況選擇治療方法,檢測方法,才能夠判斷出目前的病理狀態(tài)。
測試方法取試管6支,其中3支各精密加入對照品溶液1ml,另3支各精密加入供試品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保溫5分鐘,精密加入預(yù)熱至37℃±0.5℃的血紅蛋白試液5ml,搖勻,并準(zhǔn)確計(jì)時(shí),在37℃±0.5℃水浴中反應(yīng)10分鐘。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,搖勻,濾過,取續(xù)濾液備用。另取試管2支,各精密加入血紅蛋白試液5ml,置37℃±0.5℃水浴中保濕10分鐘,
再精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,其中1支加供試品溶液1ml,另1支加上述鹽酸溶液1ml,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,分別作為供試品和對照品的空白對照,照分光光度法(附錄ⅣA)在275nm的波長處測定吸收度,算出平均值A(chǔ)S和A,按下式計(jì)算。
A×Ws×n 每1g含蛋白酶活力(單位)=As×W×10×181.19式中 AS為對照品的平均吸收度;A為供試品的平均吸收度;Ws為對照品溶液每1ml中含酪氨酸的量,μg;W為供試品取樣量,g;n為供試品稀釋倍數(shù)。
在上述條件下,每分鐘能催化水解血紅蛋白生成1μmol酪氨酸的酶量,為一個(gè)蛋白酶活力單位。
實(shí)驗(yàn)室方法名稱: 胃蛋白酶的測定-胃蛋白酶測定法
應(yīng)用范圍: 本方法采用胃蛋白酶測定法測定胃蛋白酶的效價(jià)。
本方法適用于胃蛋白酶。
方法原理: 精密稱取本品適量,加鹽酸溶液制成每1mL中約含0.2-0.4個(gè)單位的溶液,照胃蛋白酶測定法,測定胃蛋白酶的效價(jià)。
試劑: 1. 血紅蛋白試液
2. 三氟醋酸溶液
3. 鹽酸溶液
儀器設(shè)備: 可見分光光度計(jì)
試樣制備: 1. 供試品溶液的制備
精密稱取本品適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.2-0.4個(gè)單位的溶液,作為供試品溶液。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取酪氨酸對照品適量,加鹽酸溶液稀釋制成每1mL中約含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。
注:"精密稱取"系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。"精密量取"系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。