1、細菌抑制試驗(Guthrie試驗)
此法是應(yīng)用最早,最經(jīng)濟實用的血苯丙氨酸半定量方法。
原理：枯草桿菌ATCC-6633的生長需要苯丙氨酸,如在含有苯丙氨酸拮抗劑
β-2噻吩丙氨酸培養(yǎng)基上,枯草桿菌不能生長,當放入血濾紙片標本時,血中的苯丙氨酸與培養(yǎng)基中的抑制劑相拮抗，使血濾紙片周圍出現(xiàn)明顯的細菌生長環(huán),我們可以根據(jù)細菌生長環(huán)的大小,測定血濾紙片中苯丙氨酸濃度。 但如新生兒血清中苯丙氨酸濃度超過121.1—242.1μmol/L時，細菌仍可生長。
目前上海、北京等城市已用本法進行新生兒篩選，以期及早診斷苯丙酮尿癥患者。
2.血液中苯丙氨酸測定
正常人血液中苯丙氨酸濃度為60～180μmol/L，PKU患者可高達600～3600μmol/L。
此方法是界定一個分界點，來衡量病人血液中苯丙氨酸的濃度。
(1)以258μmol/L為正常人與苯丙酮尿癥患者的分界點，則有高達4%的假陽性。用色層析法則在生后幾天的新生兒中可出現(xiàn)假陰性。MS/MS(質(zhì)譜)法可減少假陽性率，此方法可同時測定血苯丙氨酸和酪氨酸，并可計算苯丙氨酸/酷氨酸比值。
(2)如果以比值2.5為正常兒童與患者的分界點，則可將假陽性減少到1%。故目前多用此方法來篩選新生兒苯丙酮尿癥。此方法還可用來篩選半乳糖血癥、楓糖尿病、同型胱氨酸尿癥和先天性甲狀腺功能減低癥，一次檢查可以篩選多種先天性疾病。
3.尿液檢查
(1)尿三氯化鐵試驗與國產(chǎn)苯丙酮尿癥快速診斷試紙試驗：若尿中如含苯丙酮酸則三氯化鐵試驗呈綠色，放置后退色;如尿中含尿黑酸、組氨酸或氯丙嗪代謝產(chǎn)物，亦可顯綠色而呈假陽性反應(yīng)。
中國生產(chǎn)PKU試紙潤濕尿液后如呈藍綠色為陽性，并對根據(jù)色澤深淺與標準色板比較，估計尿中苯丙酮酸含量。
因血清苯丙氨酸濃度低于908—1210.6/μmol/L，尿中可無苯丙酮酸排泄，故新生兒期患者尿三氯化鐵及試紙試驗可呈陰性。
(2)2，4-硝基苯肼試驗:加入尿液產(chǎn)生黃色混濁沉淀則為陽性。
(3)尿檢易受其他因素影響，穩(wěn)定性差，假陽性率高，易造成漏診，只作為參考。
4.熒光光度測定法
利用此方法可以定量測定苯丙氨酸。
5.氨基酸層析法
可用手指或足跟血的一種較簡單的苯丙氨酸定量方法。
6.氨基酸分析法
采用氨基酸分析儀進行血氨基酸自動分析的一種定量方法?？梢愿鶕?jù)苯丙氨酸、酪氨酸等氨基酸定量以及支鏈與芳香族氨基酸的比例，對氨基酸代謝病進行鑒別診斷。氨基酸分析法在區(qū)分苯丙酮尿癥類型及高苯丙氨酸血癥鑒別上有很重要意義。
7.苯丙氨酸耐量試驗
口服苯丙氨酸100mg/kg,1-4小時后查血中苯丙氨酸,如含量增高,而酪氨酸含量降低可確診。
8.腦電圖(EEG)檢查
主要呈現(xiàn)棘慢波，偶見高波幅節(jié)律紊亂。隨年齡增長，EEG異常表現(xiàn)逐漸增多，至12歲后EEG異常才逐漸減少。
9..X線檢查
孕婦在懷孕期間檢查可見小頭畸形。
10.CT和MRI檢查
可發(fā)現(xiàn)彌漫性腦皮質(zhì)萎縮等非特異性改變。
