一、實(shí)驗(yàn)室檢查
1.血清CP及血清銅氧化酶活性測定是本病重要的診斷依據(jù)
①血清銅藍(lán)蛋白測定：WD患者血清CP<0.2g/L(正常值0.26～0.36g/L)，甚至為零，血清CP值與病情、病程及驅(qū)銅療效無關(guān)，不能作為病情監(jiān)測或療效觀察指標(biāo);新生兒血清CP值只有正常人的1/5，以后迅速升高，2～3個月達(dá)到成人水平;12歲前兒童血清CP矯正公式為：矯正后CP值=血清CP測定值×[(12-年齡)×1.7];須注意血清CP降低還見于腎病綜合征、慢性活動性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、某些吸收不良綜合征、蛋白-熱量不足性營養(yǎng)不良等;②WD患者血清CP氧化酶活力<0.2密度(正常值0.2～0.532光密度)。
2.微量銅測定
①血清銅測定：正常人為14.7～20.5mmol/L，90%的WD患者血清銅降低，血清銅與病情和療效無關(guān)，原發(fā)性膽汁性肝硬化、慢性活動性肝炎、腎病綜合征及嚴(yán)重營養(yǎng)不良等患者血清銅也可降低;②尿銅測定：多數(shù)WD患者24小時尿銅量顯著增加，服排銅藥后尿銅進(jìn)一步增高，體內(nèi)蓄積銅大量排出后尿銅量漸降低，尿銅量可作為臨床調(diào)整排銅藥劑量參考指標(biāo);WD患者通常尿銅量>200μg/24h(正常<50μg/24h)，個別高達(dá)1200μg/24h，少數(shù)患者正常或稍高;青霉胺負(fù)荷試驗(yàn)：口服青霉胺后正常人和未經(jīng)治療患者尿銅明顯增高，但患者更顯著;慢性活動性肝炎、原發(fā)性肝硬化等尿銅量也增高;③肝銅量測定：是診斷WD金標(biāo)準(zhǔn)，由于難以普遍接受肝穿刺，不能作為常規(guī)檢查，生化檢查不能確診的病例測定肝銅量是必要的，正常肝銅含量50μg/g干重，WD患者多為250μg以上/g干重，雜合子及肝病患者肝銅含量雖可增高，但不超過250μg/g干重，穿刺肝組織恰為新生肝硬化結(jié)節(jié)可出現(xiàn)假陰性;④離體培養(yǎng)皮膚成纖維細(xì)胞銅含量測定：最早由Chan等(1980)報道，國內(nèi)陳嶸等(1994)建立穩(wěn)定的離體培養(yǎng)皮膚成纖維細(xì)胞模型，對WD患者、雜合子及正常人皮膚成纖維細(xì)胞離體傳代培養(yǎng)，經(jīng)高濃度銅孵育后WD患者胞漿內(nèi)銅/蛋白比值遠(yuǎn)高于雜合子組及正常對照組，二者完全無重疊，可確診不典型病例;⑤放射性銅測定：口服或靜脈注射64Cu或67Cu后，示蹤觀察它與銅藍(lán)蛋白動力學(xué)變化，健康人放射性銅進(jìn)入血液與血漿蛋白結(jié)合，出現(xiàn)第一次血濃度高峰，放射性銅進(jìn)入肝臟并與肝銅蛋白(包括Apo-CP)結(jié)合，血漿放射性銅濃度下降，帶放射性銅的肝銅蛋白釋放入血出現(xiàn)第二次血濃度高峰;患者可出現(xiàn)四種異常：肝臟攝取銅障礙使第一次放射性血銅濃度高峰延長;放射性銅與CP結(jié)合障礙不出現(xiàn)第二次濃度高峰;膽道排銅障礙使糞便中放射性銅排泄減少而尿中排泄增加;放射性銅在體內(nèi)轉(zhuǎn)換延長。
3.肝腎功能檢查
某些WD患者早期可無肝功能異常，肝損害可出現(xiàn)不同程度肝功能異常如血清總蛋白降低、γ-球蛋白增高等;腎功能損害可出現(xiàn)血清尿素氮及肌酐增高、尿蛋白等。
二、影像學(xué)檢查
1.骨關(guān)節(jié)X線檢查
約96%患者骨關(guān)節(jié)X線異常，雙腕關(guān)節(jié)最常受損，表現(xiàn)骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、骨軟化、關(guān)節(jié)周圍或關(guān)節(jié)內(nèi)鈣化、自發(fā)性骨折和脊椎骨軟骨炎等。
2.神經(jīng)影像學(xué)檢查
CT異常率約85%，CT顯示雙側(cè)豆?fàn)詈藢ΨQ性低密度區(qū)有診斷價值，常見側(cè)腦室和第Ⅲ腦室輕度擴(kuò)大、大腦和小腦溝回變寬、腦干萎縮，紅核及齒狀核低密度。治療后影像學(xué)無改變。MRI可見雙側(cè)豆?fàn)詈藢ΨQ性受累，T2W呈同心板層型增強(qiáng)，黑質(zhì)致密帶、大腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)及大腦腳高信號，丘腦較少受累。
3.腦電圖檢查
約50%的WD患者出現(xiàn)異常，EEG改變多與病變嚴(yán)重程度一致，青霉胺及二巰基丙醇治療后EEG可改善。
4.誘發(fā)電位檢查
可證實(shí)本病感覺系統(tǒng)亞臨床損害，腦干聽覺誘發(fā)電位(BAEP)異常率最高，各波潛伏期和波峰間期延長;視覺誘發(fā)電位(VEP)表現(xiàn)N1、N2、P1波PL延長;體感誘發(fā)電位(SEP)也有改變。
5.正電子發(fā)射斷層掃描(PET)
WD患者可顯示腦局部葡萄糖代謝率(rCMRG)降低，豆?fàn)詈嗣黠@。rCMRG改變可早于CT改變，對WD早期診斷頗有價值。
6.基因診斷
WD患者及家系成員常規(guī)生化檢測發(fā)現(xiàn)，在患者、雜合子與正常人間存在10%～25%的重疊數(shù)據(jù)，影響檢測特異性?；蛟\斷對癥狀前診斷及雜合子檢出具有優(yōu)越性。①限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)連鎖分析：Figus等(1989)首次應(yīng)用RFLP對17個家系未患病個體進(jìn)行基因檢測，國內(nèi)外學(xué)者用此法對許多WD家系進(jìn)行連鎖分析，檢出不少癥狀前患者及表型正常雜合子或病理基因攜帶者;②微衛(wèi)星標(biāo)記分析：1993年國外已克隆了WD的cDNA片段，獲得WD基因附近幾個微衛(wèi)星標(biāo)記，Thomas用幾個新的微衛(wèi)星DNA對WD患者家系分析，提出單倍型有助于WD家系鑒定及其他成員診斷;③半巢式PCR-酶切分析：直接檢測WD患者14號染色體外顯子His1069GLn基因突變;④MspI酶切法：馬少春等(1998)研究發(fā)現(xiàn)，中國WD患者中8號外顯子上778密碼子突變者占28.8%，是中國WD患者高頻突變位點(diǎn);⑤熒光PCR法：黃帆等(1999)用熒光PCR技術(shù)，在58個WD家系66例患者中診斷5例有Arg778Leu突變的純合子、21例雜合子，總檢出率為39.4%，較酶切法敏感。
