1.涂片檢查
取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭氏染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭氏陰性\n雙球菌,涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者,此法陽性率在90%左右,可以初步診斷,女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽性率僅為50-60%,且有假陽性,因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人,慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。\n咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病,因?yàn)槠渌紊鷮僭谘什渴钦5木?,另外對癥狀不典型的涂片陽性應(yīng)作進(jìn)一步檢查。
2.培養(yǎng)檢查
淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對癥狀很輕或無癥狀的男性,女性病人都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽性就可確診,在基因診斷問世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法,目前國外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的Thayer-Martin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基,國內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長,在36℃,70%濕度,含5%-10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),24-48小時(shí)觀察結(jié)果,培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài),革蘭氏染色,氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等鑒定,培養(yǎng)陽性率男性80%-95%,女性80-90%。
3.抗原檢測
1.固相酶免疫試驗(yàn)(EIA):可用來檢測臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原,在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標(biāo)本需長時(shí)間遠(yuǎn)送時(shí)使用,可以在婦女人群中用來診斷淋球菌感染。\n2.直接免疫熒光試驗(yàn):通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免\n疫熒光試驗(yàn),但目前在男女二性標(biāo)本的敏感不高,特異性差,加之實(shí)驗(yàn)人員的判斷水平,故該實(shí)驗(yàn)尚不能推薦用來診斷淋球菌感染。
4.基因診斷
1.淋球菌的基因探針診斷\n淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針,染色體基因探針和rRNA基因探針。\n(1)質(zhì)粒DNA探針\n① 隱蔽質(zhì)粒DNA探針,淋球菌質(zhì)粒分為三種:接合性質(zhì)粒,分子最大,為36kb DNA; 耐藥性質(zhì)粒包括兩個(gè)質(zhì)粒,DNA長分別為5.6kb和7.1kb;隱蔽質(zhì)粒4.2kb,其中隱蔽質(zhì)粒存在于96%的臨床淋球菌分離株中,其它奈瑟菌不含有此質(zhì)粒,故可用它的序列作為特異DNA探針檢測淋球菌,Torres采用核酸雜交技術(shù)檢測淋球菌,所用探針為隱蔽質(zhì)粒,用該探針對134株淋球菌和131株相關(guān)菌株的檢測,有124株淋球菌雜交反應(yīng)陽性,占93%,還可與個(gè)別其它的奈瑟菌出現(xiàn)交叉反應(yīng),對測定探針的敏感性實(shí)驗(yàn)表明可檢出102CFU淋球菌,研究證明隱蔽質(zhì)粒中CPPB基因序列在所有的淋球菌染色體中(包括不含該質(zhì)粒的菌株),因此CPPB基因探針具有良好的特異性和敏感性,Torres等用CPPB基因探針檢測了201份臨床標(biāo)本, 采用非放射性地高辛標(biāo)記系統(tǒng), 其敏感性和特異性分別為95%和98%。\n② 耐藥性質(zhì)粒DNA探針\n淋球菌的抗藥質(zhì)??煞譃椋篭n①產(chǎn)青毒素酶淋球菌(PPNG)其β-內(nèi)酰胺酶陽性;\n②具有高水平的質(zhì)粒介導(dǎo)的耐四環(huán)素淋球菌(TRNG)。\nPPNG菌株是1976年首次在實(shí)驗(yàn)室分離得到的,該菌中含有編碼產(chǎn)青毒酶的基因,該基因既可整合于染色體上也可出現(xiàn)在質(zhì)粒DNA中,而后者居多,稱之為產(chǎn)青毒素酶質(zhì)粒,質(zhì)粒有二種,大小分別為7.4kb和5.3kb,Pescador1998年設(shè)計(jì)一特異的檢測淋球菌編碼β-內(nèi)酰胺酶基因的探針,采用酶化學(xué)發(fā)光法標(biāo)記,液相雜交,用測光計(jì)測是特異雜交體的光量,在4h內(nèi)可檢測104-105CFU的PPNG菌株,TRNG菌株雖對四環(huán)素耐藥,但通常對β-內(nèi)酰胺酶類及喹諾酮類抗菌素敏感,因此,在實(shí)驗(yàn)室藥敏檢測中可歸為敏感細(xì)菌,Pescador用抗四環(huán)素淋球菌(TRNG)tetm基因的寡核苷酸探針