急性髓細胞白血病檢查
1.外周血
外周血白細胞可以正常、升高或減少，各占1/3的比例。但不論白細胞總數(shù)是多少，其中白血病胞占了85%。有10%～15%的AML病例患病時的外周血白細胞數(shù)超過100*109/L，即高白細胞癥，多見于M4或M5型的患者，常伴肺部、中樞神經(jīng)系統(tǒng)浸潤、腫瘤溶解綜合征和白細胞黏滯癥，屬高危型，預后差。極少數(shù)患者外周血白血病細胞大于30%，而骨髓中少于30%，未達到急性白血病診斷標準，稱之為外周血型急性白血病，其中部分病例的骨髓白血病細胞數(shù)可能在隨后的幾個月內(nèi)高，對這些患者尤其老年AML患者，在外周血血小板和粒細胞減少并具有明顯危險性時(血小板<20*109/L，粒細胞<1*109/L)，可以暫緩化療。
2.骨髓象
多數(shù)患者極度增生，正常造血細胞被白血病細胞取代;少數(shù)患者骨髓增生低下，但原始細胞仍在30%以上。白血病細胞常有形態(tài)異常和核、漿發(fā)育不平衡。如胞質(zhì)內(nèi)發(fā)現(xiàn)Auer小體，更有助于排除ALL而確診為AML。有時可遇骨髓干抽現(xiàn)象，原因是白血病細胞極度積聚，致骨髓過分黏稠，或合并骨髓纖維化所致，此時須做骨髓活檢確診。
根據(jù)形態(tài)學和細胞化學特點，1976年FAB協(xié)作組指定了急性白血病分型診斷標準，并于1985年進行了修訂和擴充。
3.細胞化學染色
細胞化學染色可補充形態(tài)學的不足，在急性白血病的類型鑒別上起著重要作用。常用的細胞化學染色方法包括髓過氧化物酶染色(MPO)、蘇丹黑B染色(SBB)、氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色(NAS-DCE)、α-丁酸萘酚酯酶染色(α-NBE)、α-醋酸萘酚酯酶染色(α-NAE)、過碘酸-雪夫染色(糖原染色、PAS)、酸陛磷酸酶染色(ACP)、堿性磷酸酶染色(NAP)、溶菌酶等方法。必要時可做酯酶雙染色和Phl(φ)小體等。根據(jù)上述方法，將FAB各型初步分類。
4.電鏡檢查
電鏡檢查通過觀察細胞的超微結構，提高急性白血病形態(tài)學分類的正確性。急性粒細胞白血病、急性單核細胞白血病、急性淋巴細胞白血病和巨核細胞白血病的白細胞相互之間的鑒別，可借助電鏡細胞化學染色來明確診斷。目前電鏡細胞化學染色有MPO染色和血小板過氧化物酶(PPO)等。其優(yōu)點是靈敏度高，特異性高，能揭示白血病細胞部分早期分化特征。例如MPO反應對非常幼稚的原粒細胞白血病最具診斷價值，AML的原粒細胞對MPO反應強陽性( )，原粒細胞對MPO的反應不僅限于顆粒，亦見于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核膜和高爾基體;急性單核細胞白血病原始細胞反應弱陽性( )，部分細胞陰性;而急性淋巴細胞白血病和巨核系的原始細胞均無反應。PPO陽性反應是巨核細胞和血小板的特有標志，巨核細胞對PPO反應為陽性( )，而急性粒細胞白血病、急性單核細胞白血病和急性淋巴細胞白血病的原始細胞均陰性。
5.細胞免疫表型
常用的髓細胞系抗體為MPO、CD33、CD13、CDllb、CDl5、CD14，其他與髓系相關的抗體是CD34、HLA-DR等，抗血型糖蛋白單抗以及抗血小板糖蛋白Ⅱb/Ⅲa、Ⅰb(CD41a、CD41b、CD61、CD42a、CD42b)分別被認為是鑒別M6和M7型ANLL敏感而特異的單抗，90%以上M3型ANLL以CD33 、HLA-DR為特點，CDl4是單核細胞特異性抗體，然而敏感性不夠高，在M4和M5型ANLL中，陽性率約占70%。以上髓細胞免疫分型同樣有助于慢性粒細胞白血病急變類型的鑒別。
6.細胞遺傳學檢查
通過傳統(tǒng)方法檢測，有50%±10%的AML病例有異常的染色體核型，而染色體顯帶分析，熒光原位雜交(FISH)等細胞遺傳學技術及聚合酶鏈反應(PCR)、Northern、Southern及Western印跡等分子生物學技術的發(fā)展和應用，使人們對急性白血病細胞遺傳學和分子生物學有了更深入的認識。染色體改變包括結構和數(shù)量的異常(表1，2，6)。
(1)染色體結構異常：
?、賢(8;21)(q22;q22)和inv(16)(p13;q22)：是初治AML患者中的最常見的細胞遺傳學異常。t(8;21)占青年和兒童AML患者發(fā)病率的5%～10%，主要與M2型密切相關，同時也可見于M1和M4的病例中。在成人白血病，t(8;21)的存在表明該患者對化療反應良好，緩解率高，中位生存時間長，但在兒童白血病，t(8;21)的存在表明患者對治療反應差。伴隨inv(16)和t(16;16)的AML病例有其獨特的形態(tài)學表現(xiàn)：即急性粒單細胞白血病和M4E0，占成人和青年AML的10%～12%，嗜酸細胞>5%。多數(shù)伴inv(16)的AML病例，特別在有AML-M4-E0型樣的形態(tài)學改變的預示著有較好的預后，這一異常的染色體表達還可存在于其他的如M2，M4，M5分型的AML病例中。
?、趖(9;22)(q34;q11)：在初治AML的發(fā)生率占1%，t(9;22)通常單獨出現(xiàn)而不伴有復合染色體的改變，但有時伴t(9;22)易位的AML可出現(xiàn)-7及不同的三倍體。
③t(15;17)(q22;q21)：是M3(APL)的特異性染色體改變，見于90%以上的M3病例。1%～2%APL患者有t(11;17)易位，個別患者存在t(5;17)易位。具有典型t(15;17)的患者對全反式維A酸(ATRA)有良好的治療反應，而其他二型對ATRA無反應。
?、?1q23重排：累及11q23條帶重排形式的多見于AML(M4)、ALL、MDS和繼發(fā)于曾經(jīng)接受拓撲異構酶Ⅱ抑制劑而引起的AML。目前發(fā)現(xiàn)有大約30種的不同的染色體區(qū)帶可與11q23發(fā)生易位。例如t(11;19)常見于嬰兒白血病，經(jīng)誘導分化治療后具有髓系和淋巴系雙表型特征，說明染色體易位可能發(fā)生在多能造血干細胞階段;在90%以上伴有11q23異常的白血病患者，可以累及不同的基因，一般認為，累及11q23上的MLL(ALL-1，HRX，Ht-2X)基因通常預后較差。
?、輎nv(3)(q2l;q26)：伴inv(3)(q2l;q26)的AML是一個獨特亞群，常伴微小巨核細胞增多和異常血小板增生，這些血液學異常也可見于t(3;3)(q2l;q26)的病例。累及3q異常的血液病患者預后通常較差。
(2)染色體數(shù)量異常：
① 8：是AML最常見的核型改變，約占AML患者核型異常的20%。 8作為原發(fā)改變多見于M1、M4和M5，在M3型中較少見，而作為繼發(fā)改變，多見于M3型，也偶見于M2型。
② 21：有1%的發(fā)生率，而且多發(fā)生于同時有del(5q)，-7染色體改變的AML病患。
?、?7：在AML患者中有1%～3%的發(fā)生率，其出現(xiàn)可能與接觸某些化學物質(zhì)有關，伴有-7的AML患者對治療不敏感，并代表該疾病的不良預后。
④-5：與毒物接觸有關，常見于治療相關的AML(t-AML)。
?、菪匀旧w減少：常見于M2型，伴隨t(8;21)。作為單一核型異常，-X明顯比-Y少。在臨床上，骨髓細胞-Y往往代表正常男性老年化現(xiàn)象，但有時是腫瘤細胞惟一的核型改變。
7.分子生物學檢測
有的融合基因如PML-RARα、AMLl-ETO需要用分子生物學技術才會予以確診(即所謂MCIM分型)，或觀察殘余白血病。而有的如前文所述，單基因如N-RAS、K-RAs和BCL-2等癌基因和腫瘤抑制基因RB1和p 53等質(zhì)或量的表達異?？赡芘c某些AML的發(fā)生有關。這些基因檢測對預測AML的預后有一定價值。
(1)p53：p53在AML中的表達低，往往預示預后差。
(2)nm-23 ：nm-23-H1、nm-23-H2mRNA在AML、CML-BC中，水平增高，在CML-CP則正常，nm-23-H1和nm-23-H2在有染色體異常AML-M2和AML-M3中的表達比無染色體畸變的其他類型的AML亞型低;而在AML-M6病例中nm-23表達水平極高。
(3)BCL-2：在AML中，M1、M2亞型的BCL-2表達高于M3、M4、M5，并且高表達者生存時間短，化療效果差。
(4)p16：AML中p16的同源基因p15功能滅活率高達86%，另外，初治和復發(fā)AML其骨髓細胞p16表達活性明顯低于正常對照和處于長期緩解AML的骨髓細胞。
(5)WT-1：白血病患者診斷初期的骨髓中的WT-1基因呈高度表達，而當該患者經(jīng)過治療臨床達到緩解后，WT-1基因消失，有研究者動態(tài)觀察了33例白血病患者(26例AML患者，7例ALL患者)和6例正常人的外周血中的WT-I基因表達，發(fā)現(xiàn)6例正常人均未檢測出WT-1轉錄的最低水平(<10-4)，而3l例(93.9%)白血病患者的WT-l在疾病初期呈不同水平的表達(10-4～101)，而且WT-l基因的表達在AML和ALL無差異，研究者又隨訪檢測了31例獲得CR后的白血病患者的外周血的。WT-1水平表達，共有5例病例復發(fā)，(其中2/18例患者并不能檢測出WT-1表達，而3/13患者檢測出低水平的WT-1表達)，該5例患者中的3例在復發(fā)時WT-1表達再次升高，提示T-1是一敏感的腫瘤標記，能用于監(jiān)測白血病患者經(jīng)化療或CR后的微小殘留病灶。
8.一些AML患者的血清和尿液中的乳酸脫氫酶(LDH)和溶菌酶升高，
而這些指標的升高表示著腫瘤相應的負荷量，多見于M5和M4型患者。鈣代謝混亂相對少見，表現(xiàn)為高鈣血癥或低鈣血癥。可能與白血病細胞產(chǎn)生并釋放一些甲狀旁腺素樣物質(zhì)有關。
9.骨髓病理
白血病患者全身骨髓均有白血病細胞增生浸潤，肉眼可見骨髓呈棕色，或灰白略帶綠色膿樣色澤，如有出血則呈暗紅色或紅褐色，白血病細胞增生嚴重時長骨中的黃髓也可被紅髓所代替(即由白血病細胞增生所占據(jù))。白血病常伴有骨小梁減少變細或蟲蝕樣缺損，這與骨髓內(nèi)壓力增高以及骨小梁供血不足有關。網(wǎng)狀纖維增多或膠原纖維增生。
10.凝血異常
出現(xiàn)DIC時可出現(xiàn)血小板減少，凝血酶原和部分凝血活酶時間延長，血漿纖維蛋白原減少，纖維蛋白降解產(chǎn)物增加和凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅹ等的缺乏。
11.代謝異常
高尿酸血癥常見于白細胞數(shù)增高和誘導化療期患者，且與腫瘤溶解有關，但AML的高尿酸血癥發(fā)生率比ALL低;血清乳酸脫氫酶(LDH)可升高，尤其是M4、M5亞型，其增高程度一般也輕于ALL;血清溶菌酶(1ysozyme)增高亦以M4、M5型多見;過量溶菌酶可損傷腎近曲小管，加上白血病本身的代謝異常，抗生素、利尿劑等治療的影響可導致低鉀血癥;高鉀血癥的出現(xiàn)與腫瘤溶解及高尿酸血癥有關;有時還可發(fā)生低鈣或高鈣血癥。
