棘阿米巴性角膜炎檢查
1.10%KOH濕封片檢查 取病灶區(qū)角膜刮片組織、棘阿米巴原蟲的培養(yǎng)物或手術(shù)切除的角膜材料,涂于或鋪于載玻片上,加1滴10%KOH溶液,普通顯微鏡下清晰顯示該原蟲的雙層壁包囊形態(tài)。該方法簡(jiǎn)單、實(shí)用,適合基層醫(yī)院開展。有條件的醫(yī)院可采用Hemacolor染色、三重染色、Calcoflour white等其他染色方法檢查。
2.棘阿米巴原蟲培養(yǎng) 將角膜刮片組織放入2%無營(yíng)養(yǎng)瓊脂表面滴1滴活的或死的大腸埃希桿菌肉湯于接種物表面,放35℃溫箱內(nèi)培養(yǎng),一般于3~7天可繁殖出大量的棘阿米巴原蟲。通過倒置顯微鏡可直接觀察到棘阿米巴原蟲的滋養(yǎng)體和包囊,以及棘阿米巴原蟲在溫蒸餾水中形成棘突的狀態(tài)。
3.免疫熒光技術(shù)檢查 目前至少有8種棘阿米巴原蟲可引起人類角膜炎,可應(yīng)用不同種的棘阿米巴原蟲抗體通過間接免疫熒光方法對(duì)棘阿米巴原蟲進(jìn)行種別鑒定。目前,我國(guó)還沒有這類抗體,如必要可送往美國(guó)疾病控制中心(CDC)進(jìn)行鑒定。
4.病理切片染色檢查 材料取自環(huán)鉆鉆取的角膜病變組織和手術(shù)切除的角膜病變組織,經(jīng)固定、脫水、浸蠟、包埋、切片,然后再經(jīng)蘇木精-伊紅(HE)或過碘酸-Schiff(PAS)染色。通過上述兩種方法染色可清晰的顯示角膜內(nèi)棘阿米巴原蟲的包囊。通過病理檢查還可驗(yàn)證刮片或原蟲培養(yǎng)的結(jié)果。根據(jù)需要和條件也可對(duì)病理切片經(jīng)吉姆薩、瑞氏、三重和Calcoflour white等染色方法進(jìn)行診斷。
5.共焦顯微鏡直接檢查 上述檢查方法均屬創(chuàng)傷性診斷技術(shù)。為了獲取組織,需在病灶部位采取,造成角膜一定的損傷。最近推出的共焦顯微鏡(confocal microscope)可直接對(duì)AK患者進(jìn)行觀察,是一種無創(chuàng)傷、對(duì)比度高、放大率高的早期快速診斷方法,可在角膜各層(從上皮至內(nèi)皮)查到棘阿米巴原蟲的影像。有時(shí)甚至可以發(fā)現(xiàn)棘阿米巴原蟲伸出的偽足,或不規(guī)則的神經(jīng)腫脹增厚和邊緣粗糙的影像。