三級甲等綜合醫(yī)院國營
北京協和醫(yī)院是集醫(yī)療、教學、科研于一體的現代化綜合三級甲等醫(yī)院,是國家衛(wèi)生健康委指定的全國疑難重癥診治指導中心,最早承擔高干保健和外賓醫(yī)療任務的醫(yī)院之一,也是高等醫(yī)學教育和住院醫(yī)師規(guī)范化培訓國家 級
隨著分子生物學的發(fā)展,檢測手段不斷增加。目前主要從分子水平、蛋白水平、細胞水平多途徑展開了研究。
1.分子水平:由于人腫瘤細胞幾乎不存在MDR1DNA擴增,因此,無法檢測DNA變化,主要是檢測MDR1mRNA的表達水平。常用的方法包括:RT-PCR、原位雜交(ISH)、Slot-blot(SB)、Northernblot(NB)、RNase保護實驗等。
2.蛋白水平:免疫組織化學法(IHC),免疫熒光等。常用的P-gp特異性單克隆抗體有JSB-1、MRK1、C219、U12、HYB-612等,不同的單抗識別不同的抗原決定簇,每種單抗特異性和親合力不完全相同。
3.細胞水平:檢測細胞的藥物輸出功能,采用熒光染料如若丹明-123或具有天然熒光的柔紅霉素與細胞共同培養(yǎng)后,用熒光分光度計測定單個細胞內藥物濃度,與對照組比較判定細胞的耐藥程度。
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