1.外周血象 白細(xì)胞總數(shù)正常或稍增多。
2.病毒分離 是確診的主要方法，具有節(jié)省、快速和準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)，而避免了血清學(xué)方法所遇到的血清型繁多的困難。
從糞便中分離病毒的陽(yáng)性率最高，起病后10天內(nèi)仍可陽(yáng)性。在起病前36h及發(fā)熱期間可從血中分離出病毒。呼吸道感染者可從咽拭或含嗽液中分離病毒。腦脊液中分離病毒陽(yáng)性率較低，但確診意義較大。其他標(biāo)本包括胸腔積液、心包積液、尿液、肌肉活檢組織和尸檢神經(jīng)組織均可送檢。糞便標(biāo)本可保存于4℃多日，其他標(biāo)本需保存于-7℃以下。
從糞便及呼吸道中分離出病毒僅具有參考意義，因?yàn)榭赡苁呛喜⒏腥?。而從血液、腦脊液和心包積液中分離出病毒則具有確診意義。所以應(yīng)盡可能從多個(gè)來(lái)源采集標(biāo)本，以增加結(jié)果的可靠性。
柯薩奇A組病毒除A9和A16血清型可用細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒外，其余血清型均需通過(guò)各種途徑(皮下、腹腔內(nèi)、腦內(nèi)等)接種乳小鼠來(lái)分離病毒。先觀察病理變化，然后用特異性抗血清作中和試驗(yàn)加以證實(shí)。最近采用RD細(xì)胞(人橫紋肌肉瘤細(xì)胞)株可分離培養(yǎng)出除柯薩奇A1、A19、A22型病毒以外的其他A組病毒。分離柯薩奇B組病毒以組織培養(yǎng)為首選，常用細(xì)胞株有猴腎、人胚腎和Hela細(xì)胞，采用非洲綠猴腎(BGM)細(xì)胞株和RD細(xì)胞株效果更佳。2～5天后先觀察細(xì)胞病變作初步診斷，然后用特異性抗血清作中和試驗(yàn)加以鑒定。全過(guò)程約需1～3周，但作為臨床確診可不必等待血清型的鑒定結(jié)果。
3.血清學(xué)檢查 由于血清型繁多，僅在下列情況下才適用：①已分離出病毒，作為確定血清型時(shí);②已發(fā)現(xiàn)特征性臨床表現(xiàn)如流行性胸痛，明顯指示采用某些特定抗原(如B組病毒)來(lái)檢測(cè)抗體時(shí);或手、足、口腔病通常由柯薩奇A16型病毒所引起時(shí);③正在發(fā)生由單一血清型病毒引起流行時(shí);④用于某一特定血清型的血清流行病學(xué)調(diào)查時(shí)。
血清學(xué)檢查方法中，中和試驗(yàn)是鑒定已分離病毒血清型最特異的方法。但作為檢測(cè)腸道病毒感染的抗體，則中和試驗(yàn)還不夠敏感，而且操作繁復(fù)，價(jià)格昂貴?；颊咴诓〕痰?周開(kāi)始出現(xiàn)中和抗體，2～3周后達(dá)高峰，并保持3～6年。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)的特異性較低，異型抗體出現(xiàn)率較高。但補(bǔ)體結(jié)合抗體與中和抗體同時(shí)出現(xiàn)，而僅保持2～3個(gè)月，可作為近期感染的依據(jù)。血凝抑制試驗(yàn)用途不大，因僅1/3腸道病毒產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集素，甚至在同一血清型也可有部分毒株產(chǎn)生而其余毒株不產(chǎn)生紅細(xì)胞凝集素。最近有報(bào)告采用免疫印跡法檢測(cè)IgM型腸道病毒抗體，陽(yáng)性率達(dá)60%，大多數(shù)為群特異性(22/31)，少數(shù)為型特異性。有型特異性中和抗體和補(bǔ)體結(jié)合抗體經(jīng)胎盤和母乳由母體被動(dòng)轉(zhuǎn)移至嬰兒。腸道內(nèi)的局部抗體亦有保護(hù)作用。有報(bào)道以熱處理病毒為抗原和以合成多肽為抗原作ELISA法檢測(cè)IgG抗體，其敏感性(以病毒分離為對(duì)照)分別為0.67和0.62，高于補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。在病毒分離陰性的56例中，IgG-ELISA法雙份血清滴度有顯著升高者分別為13和19例，適用于臨床診斷。
近年來(lái)陸續(xù)報(bào)道用PCR法檢測(cè)血清中腸道病毒RNA，具有很高靈敏度和特異性，陽(yáng)性率顯著高于細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒。
