一、檢查:
1.MTB的檢出:是確認(rèn)結(jié)核病的主要依據(jù)。直接厚涂片抗酸染色顯微鏡檢查快速、簡便、假陽性少。鏡檢結(jié)果報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)為:每300視野未檢出者為(-),每300視野內(nèi)檢出1~2個(gè)者報(bào)菌數(shù);每100視野檢出3~9個(gè)者為(+);每10視野檢出3~9個(gè)者為(++);每視野檢出1~9個(gè)者為(+++);每視野檢出≥10個(gè)者為(++++)。
2.結(jié)核菌素試驗(yàn)(簡稱結(jié)素試驗(yàn)):舊結(jié)素(OT)是一種粗制的提取物,由MTB已死亡的液體培養(yǎng)基中提煉的MTB代謝產(chǎn)物,主要成分為結(jié)核蛋白。OT中尚含有其他抗原,注射后還可引起非特異性反應(yīng)。PPD為結(jié)素純蛋白衍生物,優(yōu)于OT。經(jīng)硫酸銨沉淀制成PPD-S,精純、高效,非特異性變態(tài)反應(yīng)極少見,已被WHO定為哺乳類國際標(biāo)準(zhǔn)結(jié)素。WHO委托丹麥生產(chǎn)的定名為PPD-RT23,被國際上廣泛應(yīng)用。20世紀(jì)80年代與90年代我國生產(chǎn)的PPD-C與BCG-PPD,兩種PPD的蛋白含量均與PPD-S相近,高于PPD-RT23,目前已在國內(nèi)應(yīng)用。前者供卡介苗接種篩選對象、質(zhì)量監(jiān)測及臨床輔助診斷用;后者供流行病學(xué)調(diào)查用。
結(jié)核菌素試驗(yàn)主要用于結(jié)核感染的流行病學(xué)調(diào)查??ń槊缃臃N后可呈弱陽性反應(yīng)。中度陽性表示曾感染結(jié)核。我國城市居民感染率高達(dá)80%,成人結(jié)核菌素試驗(yàn)陽性反應(yīng)無診斷意義。在3歲以下嬰幼兒結(jié)核菌素試驗(yàn)陽性反應(yīng)按活動性結(jié)核病論,成人強(qiáng)陽性反應(yīng)提示活動性結(jié)核病可能,應(yīng)進(jìn)一步檢查。如用1U高稀釋度液作皮試呈強(qiáng)陽性反應(yīng),可提示體內(nèi)有活動性結(jié)核灶,目前所用結(jié)素并非高度特異,與其他分枝桿菌,如奴卡菌和棒狀桿菌等有共同的細(xì)胞壁抗原,亦可引起OT試驗(yàn)呈弱陽性反應(yīng)。在急性病毒感染(麻疹、流行性腮腺炎、水痘)、HIV感染、應(yīng)用糖皮質(zhì)激素等免疫抑制藥者、結(jié)節(jié)病、腫瘤、腎衰竭、營養(yǎng)不良、老年人DTH反應(yīng)衰退者均可呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。尚有少數(shù)極重度結(jié)核病者結(jié)素反應(yīng)陰性,其機(jī)制尚不清楚。當(dāng)排除上述疾病的影響因素后,特別是較高濃度的結(jié)核菌素試驗(yàn)(10~100U)陰性反應(yīng)才能排除結(jié)核病。
3.新診斷技術(shù)
1)新一代的BACTEC MGIT960是集分枝桿菌快速生長培養(yǎng)、檢測及藥敏技術(shù)為一體的全自動分枝桿菌培養(yǎng)儀。MGIT依賴一種氧敏感熒光化合物檢測分枝桿菌的生長,用Middlebrook 7H9培養(yǎng)基加有硅鑲嵌熒光化合物,溶解于培養(yǎng)基內(nèi)的氧猝滅化合物的熒光。細(xì)菌接種后消耗氧,產(chǎn)生熒光,用長波紫外燈或紫外透射儀365nm處觀察。該技術(shù)明顯縮短試驗(yàn)的時(shí)間,據(jù)報(bào)道能累計(jì)縮短65天,有利于結(jié)核的診斷和治療。
2)結(jié)核病細(xì)菌學(xué)基因診斷體系:測定MTB核酸同源性序列的標(biāo)記核酸片斷或序列核酸探針(DNA probe),能使MTB DNA體外擴(kuò)增的聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù),以及利用直接觀察細(xì)菌染色體的限制性內(nèi)切核酸酶特征性帶譜鑒定分離株的核酸指印技術(shù)得以應(yīng)用。目前對核酸指印技術(shù)與核酸探針技術(shù)的實(shí)驗(yàn)室研究尚需進(jìn)一步加強(qiáng)。
3)血清學(xué)診斷:已在臨床中應(yīng)用的診斷技術(shù)有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)、點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)(dot immunobinding assay,DIBA)、蛋白印跡法(Western blotting)、固相抗體競爭試驗(yàn)(solid-phase antibody competition test,SACT)等,但仍有許多問題要研究。
4.X線檢查 包括透視、X線片、CT等。有助于早期診斷,并對病變部位、范圍、性質(zhì)、演變情況及治療效果做出判斷。
5.內(nèi)鏡檢查 包括纖維支氣管鏡、胸腔鏡、纖維結(jié)腸鏡、乙狀結(jié)腸鏡、腹腔鏡、膀胱鏡等。對某些結(jié)核病可提供病原學(xué)和病理學(xué)診斷。
6.活體組織檢查 對不排菌的肺結(jié)核以及與外界不溝通的臟器的結(jié)核病,可通過組織活體檢查進(jìn)行病原學(xué)和病理學(xué)診斷,如肺臟、胸膜、腹膜、肝臟、淋巴結(jié)等。