淋球菌感染檢查
包括涂片檢查,培養(yǎng)檢查,抗原檢測(cè),基因診斷,藥敏試驗(yàn)及產(chǎn)青霉素酶淋球菌(PPNG)測(cè)定。
1.涂片檢查
取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物,作革蘭染色,在多形核白細(xì)胞內(nèi)找到革蘭陰性雙球菌。涂片法特異度較高,對(duì)急性患者靈敏度也較高,對(duì)慢性患者靈敏度較差。女性宮頸分泌物中雜菌多,敏感性和特異性較差,陽(yáng)性率僅為50%~60%,且有假陽(yáng)性,適合用培養(yǎng)法檢查。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少,陽(yáng)性率低,因此要取前列腺按摩液,以提高檢出率。咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭陰性雙球菌不能診斷淋病,因?yàn)槠渌紊蚓鷮僭谘什渴钦5木?,需做糖發(fā)酵試驗(yàn)進(jìn)一步診斷。另外對(duì)癥狀不典型的涂片陽(yáng)性應(yīng)作進(jìn)一步檢查。
2.培養(yǎng)檢查
淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證,培養(yǎng)法對(duì)癥狀很輕或無(wú)癥狀的男性、女性患者都是較敏感的方法,只要培養(yǎng)陽(yáng)性就可確診,也是目前診斷無(wú)癥淋球菌感染的唯一可靠的方法。在基因診斷問(wèn)世以前,培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的惟一方法。目前國(guó)外推薦選擇培養(yǎng)基有改良的Thayer-Martin(TM)培養(yǎng)基和New York City(NYC)培養(yǎng)基。國(guó)內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基,均含有抗生素,可選擇地抑制許多其他細(xì)菌生長(zhǎng)。在36℃,70%濕度,含5%~10%二氧化碳(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng),24~48h觀察結(jié)果。培養(yǎng)后還需進(jìn)行菌落形態(tài),革蘭染色,氧化酶試驗(yàn)和糖發(fā)酵試驗(yàn)等鑒定。培養(yǎng)陽(yáng)性率男性80%~95%,女性80%~90%。
3.抗原檢測(cè)
(1)固相酶免疫試驗(yàn)(EIA):可用來(lái)檢測(cè)臨床標(biāo)本中的淋球菌抗原。先用稀釋的標(biāo)本液 包被載體, 然后加入抗淋球菌抗體, 再加入辣根過(guò)氧化酶偶聯(lián)的羊抗兔免疫璩蛋白,以上各步均經(jīng)溫育,水洗,最后加底物顯色,并用分光光度計(jì)記錄數(shù)據(jù),分析結(jié)果。
(2)直接免疫熒光試驗(yàn):通過(guò)熒光標(biāo)記的單克隆抗體直接檢測(cè)淋球菌外膜蛋白-1。此法不僅敏感性較好, 且無(wú)交叉反應(yīng),是一種快速而準(zhǔn)確的方法。在女性患者的標(biāo)本檢驗(yàn)中也獲得較好的效果。
(3)協(xié)同凝集試驗(yàn) 用抗淋球菌蛋白I單克隆抗體致敏葡萄球菌A蛋白可與淋球菌發(fā)生協(xié)同凝集反應(yīng)。此試驗(yàn)簡(jiǎn)易、快速、不需特豫設(shè)備, 敏惑性與特異性均較高。
4.基因診斷
(1)基因探針診斷:淋球菌的基因探針診斷,所用的探針有:質(zhì)粒DNA探針、染色體基因探針和rRNA基因探針?;蛱结樤\斷的敏感性較差。DNA探針?lè)ǖ拿舾行耘c特異性均較高,是診斷淋病的一種快速可靠的方法,但此法由于條件所限,不便普及。
(2)基因擴(kuò)增檢測(cè):PCR技術(shù)的出現(xiàn)進(jìn)一步提高了淋球菌檢測(cè)的靈敏性,它具有快速、靈敏、特異、簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn),可以直接檢測(cè)臨床標(biāo)本中極微量的病原體,但因?qū)嶒?yàn)條件要求高,技術(shù)難掌握。操作時(shí)要防止污染,以免出現(xiàn)假陽(yáng)性。
5.藥敏試驗(yàn)
在培養(yǎng)陽(yáng)性后進(jìn)一步作藥敏試驗(yàn)。用紙片擴(kuò)散法做敏感試驗(yàn),或用瓊脂平皿稀釋法測(cè)定最小抑菌濃度(MIC),用以指導(dǎo)選用抗生素。
6.PPNG檢測(cè)
β內(nèi)酰胺酶,用紙片酸度定量法,使用Whatman I號(hào)濾紙PPNG菌株能使其顏色由藍(lán)變黃,陽(yáng)性為P-PPNG,陰性為N-PPNG。