肝纖維化檢查
一】實(shí)驗(yàn)室檢查
1.反應(yīng)細(xì)胞外間質(zhì)代謝的指標(biāo)
(1)參與膠原及基質(zhì)代謝有關(guān)酶的檢測：
①脯氨酸4-羥化酶
(proline-4-hydroxylase，PH)：PH是一種糖蛋白，血清PH水平與肝纖維化程度相關(guān)。但非肝纖維化有，例如阻塞性黃疸亦可升高，現(xiàn)已有制備的PHβ亞單抗，用免疫學(xué)方法檢測血清PH含量，使敏感性提高約20倍。
?、趩伟费趸?MAO)：MAO參與膠原的交叉連接，使可溶性的膠原纖維分子內(nèi)發(fā)生共價交聯(lián)，從而形成不溶性的膠原纖維。血清中MAO活性的升高與肝纖維化的程度是平行的，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)MAO有4種同工酶，其中MAO1在肝纖維化時明顯升高、但MAO測定的敏感性低，操作復(fù)雜，所以未能廣泛應(yīng)用。
?、跴-Z肽酶：該酶是一種內(nèi)切酶，其活性可作為膠原降解指標(biāo)，常與P-Ⅲ-P同時檢測，國外有人將P-Ⅲ-P/PZ-肽酶的比值作為肝纖維化動態(tài)非創(chuàng)傷性指標(biāo)。國人殷蔚荑等對此研究，結(jié)果認(rèn)為血清P-Ⅲ-P/P-Z肽酶比值隨肝纖維化程度的加劇而升高。表明P-Ⅲ-P/P-Z肽酶比值是反映膠原代謝及肝纖維化程度有益指標(biāo)。
(2)膠原、前膠原肽及膠原代謝產(chǎn)物的檢測：
?、佗笮颓澳z原(PC-Ⅲ)及Ⅲ型前膠原末端肽(P-Ⅲ-P)：PC-Ⅲ由細(xì)胞分泌到血液中時，氨基(N)端和羧基(C)端肽被內(nèi)切酶切下游離在血中，隨膠原合成的活躍而增加。P-Ⅲ-P直徑為60nm，這些肽端可調(diào)節(jié)膠原纖維的直徑。1985年Galambos等以山羊胎皮中提取PC-Ⅲ，建立的RIA檢測法，測定50例肝病血清PC-Ⅲ，結(jié)果顯示PC-Ⅲ值與肝纖維活動程度相關(guān)。 1990年國人李偉道等以人胎皮中提取PC-Ⅲ建立了PC-Ⅲ的RIA法，其正常人限為120μg/L。1979年，Rohde首先從胎牛皮中提取了Ⅲ型前膠原的氨基端多肽、并建立了放射免疫法，報(bào)道P-Ⅲ-P測定在肝病診斷中的意義。至今國內(nèi)外有關(guān)P-Ⅲ-P的研究報(bào)道較多，認(rèn)為P-Ⅲ-P至今仍是反映肝纖維化活動程度的良好指標(biāo)，以及判斷抗纖維化藥物療程及慢性肝病預(yù)后的較好指標(biāo)。但仍有一些問題需要探討。首先它無器官特異性，所以在診斷肝病時，要先除外其他疾病引起的P-Ⅲ-P升高的情況。其次，在各種肝病中血清P-Ⅲ-P含量有較大重疊所以難以確定肝病的類型。
?、冖粜湍z原及其分解片段(7S片段和NC1片段)的測定：Ⅳ型膠原分布于肝竇內(nèi)皮細(xì)胞下，是構(gòu)成基底膜的主要成分，與LN有高度親合性，過度沉積使肝竇毛細(xì)血管化、肝竇組織結(jié)構(gòu)和肝血流改變，使肝營養(yǎng)受限，從而加劇肝臟病變。在肝纖維化性早期已有Ⅳ膠原的沉積，血中P-Ⅲ-P、7S、NC-1含量均增高，以7S及CN-1為明顯。有人認(rèn)為血清7S及NC1含量是反映膠原合成的敏感指標(biāo)。亦有報(bào)道，用酶聯(lián)法測血清Ⅳ膠原試藥盒(日本)已供應(yīng)于市場。
(3)基質(zhì)成分改變有關(guān)指標(biāo)：
?、賹诱尺B蛋白(LN)：LN又稱層黏素、極層素，是基質(zhì)中一種非膠原性結(jié)構(gòu)糖蛋白，為基底膜的特有成分，經(jīng)消化酶分解為7個肽片段，大部分抗原決定簇存在于片段Ⅰ(LNP1)，分子量約為250KD。現(xiàn)均使用LNPI的抗原-抗體系統(tǒng)建立RIA檢測方法，既可獲得足夠抗原，又不影響檢測的特異性與敏感性，使血清LN水平檢測方法的推廣使用成為可能。Misoki等用RIA法測定正常人與不同肝病患者的血清LN水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)正常人、慢遷肝、慢活肝和肝硬化分別1340、1600、2060和2200ng/L。目前多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，血清LN可作為診斷早期肝纖維化指標(biāo)之一，但非特異的，惡性腫瘤和胰腺疾病等患者血清LN亦可升高，故LN仍有一定局限性。
?、诶w維連接蛋白(FN)及其受體(FNR)：在肝臟中，F(xiàn)N主要存在于肝竇壁內(nèi)與Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原共存，起支架作用，亦是構(gòu)成基底膜的成分。血清中FN測定國內(nèi)已有較多報(bào)道，用單擴(kuò)法、血凝法和火箭電泳法測定，急性及慢性肝炎患者血清FN增高，早期肝硬化者FN亦明顯增高;而失代償后則降低。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，不是早期診斷肝纖維化的良好指標(biāo)。國外有報(bào)道，用酶聯(lián)法檢測75例經(jīng)肝活檢確診血清β-亞單位FNR的結(jié)果，認(rèn)為血清FNR水平與肝纖維化程度密切相關(guān)，但未見有更多的報(bào)道證實(shí)。
?、弁该髻|(zhì)酸(HA)：HA是一種最單一的糖胺多糖，是由間質(zhì)細(xì)胞合成，經(jīng)淋巴路到淋巴結(jié)，最終入血。大多數(shù)HA由肝臟內(nèi)皮細(xì)胞攝取，并由間質(zhì)細(xì)胞將其降解為乙酸和乳酸，經(jīng)腎排出。有報(bào)道在117例肝病患者中，47例經(jīng)病理診斷的肝硬化者血HA均高于100μg/L，且多數(shù)高于200μg/L;70例非肝硬化者僅有26例高于100μg/L;207例正常對照者中，僅有5人高于100μg/L。國內(nèi)外已有較多關(guān)于HA在肝病中應(yīng)用的報(bào)道，其結(jié)果可歸納為急性肝炎、慢遷肝、慢活肝和肝硬化血清HA均有不同程度升高，與肝臟損害程度、肝纖維化活動程度相關(guān)。但應(yīng)注意，惡性腫瘤、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及呼吸窘迫綜合征等患者血清HA升高。
2.參與調(diào)節(jié)肝纖維化形成的細(xì)胞因子檢測
在急性肝炎的修復(fù)過程中，TGF-β1可能具有啟動膠原與其他間質(zhì)的合成作用，有人認(rèn)為TGF-β1可能是聯(lián)結(jié)炎癥過程與肝纖維化兩者之間的因子。關(guān)于血清TNF-ɑ臨床已有較多報(bào)道，有人通過動物實(shí)驗(yàn)與臨床研究，認(rèn)為血吸蟲病肝纖維化活動程度與血清TNF-ɑ、HA相關(guān)，若在進(jìn)行廣泛研究的基礎(chǔ)上預(yù)測血清細(xì)胞因子的水平作為活動肝纖維化診斷的輔助指標(biāo)，值得深入研究。
二】影像學(xué)檢查
1、超聲波檢查
肝纖維化時有肝回聲異常的改變。
2.CT
CT可以發(fā)現(xiàn)肝包膜增厚，肝表面輪廓不規(guī)則或呈結(jié)節(jié)狀，肝實(shí)質(zhì)回聲不均勻增強(qiáng)或CT值升高，各葉比例發(fā)生改變，脾臟厚度增加，門靜脈及脾靜脈增寬。彩色多普勒可以測定肝動脈和門靜脈的血流量及功能性門-體分流情況。但總體上影像學(xué)檢查對于診斷肝纖維化不夠敏感。
