1.血常規(guī)
炭疽患者外周血白細胞明顯增高,一般為(10~20)*109/L,可高達(60~80)*109/L,分類中性粒細胞增高。
2.細菌學(xué)檢查
確診依靠從傷口分泌液,皮膚焦痂,痰,血液,嘔吐物,糞便以及腦脊液中直接涂片檢查或培養(yǎng)分離到炭疽桿菌。
(1)直接涂片檢查:采集感染部位的標本如皮膚炭疽患者水皰液,肺炭疽患者痰液,腸炭疽患者腹瀉物或嘔吐物,腦膜炎患者腦脊液等直接涂片,革蘭染色,見到典型炭疽桿菌并結(jié)合臨床表現(xiàn)可作出初步診斷,炭疽芽孢可用甲基藍或印度墨染色后在顯微鏡下得到證實。
(2)細菌培養(yǎng)鑒定:血培養(yǎng)陽性率高,但皮損組織陽性率為60%~80%,鼻咽拭子培養(yǎng)陽性率更低,炭疽桿菌在肉湯培養(yǎng)基中形成長鏈或呈絮狀沉淀生長,在血平板,37℃ 24h后形成不溶血,灰色,粗糙型菌落,在低倍鏡下觀察菌落呈卷發(fā)狀,鑒定:
?、俅樵囼灒禾烤覘U菌在0.05~0.1U/ml青霉素培養(yǎng)基中形態(tài)改變,成串珠狀的圓球形菌體,相連似念珠,而類炭疽無此反應(yīng),
②重碳酸鹽毒力試驗陽性:將待檢菌接種于含0.5%碳酸氫鈉瓊脂平板上,置于10%二氧化碳環(huán)境中37℃ 24~48h,有毒菌株形成莢膜,呈黏液型;無毒菌株不形成莢膜,呈粗糙型菌落,臨床上有對青霉素耐藥報道,所以對培養(yǎng)菌落做藥敏實驗是必要的,尤其是針對生物恐怖相關(guān)性的炭疽病例。
(3)血清學(xué)檢查:血清學(xué)診斷價值較小,一般用于流行病學(xué)調(diào)查,如針對芽孢抗原的酶聯(lián)免疫吸附試驗,如抗體滴度呈4倍增高,提示近期曾感染或接種疫苗,也可采用針對保護性抗體的酶聯(lián)免疫電泳實驗或間接血凝實驗協(xié)助診斷。
(4)分子生物學(xué)檢查:聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)特異性擴增炭疽桿菌或炭疽芽孢特異性標記物,即可用于診斷,也可用于分型,協(xié)助判斷傳染來源,PCR診斷的主要靶基因是編碼毒力因子的基因,毒素基因(pagA,lef,and cya)由毒力質(zhì)粒pXO1編碼,莢膜(capB,capC,and capA)的生物合成由pXO2編碼,這些毒力基因是炭疽桿菌特有的,因此基于質(zhì)粒的檢測方法特異性很高,然而,也有報道某些炭疽桿菌株缺乏這些質(zhì)粒,因此,開發(fā)一種針對染色體上特異的位置的方法來檢測無毒的和有質(zhì)粒的炭疽桿菌非常必要,最近,Qi等人開發(fā)了一種熒光共振能量轉(zhuǎn)移PCR法,針對炭疽桿菌染色體定位上的rpoB基因,這種方法似乎是迄今為止最特異的,175例非炭疽桿菌的標本中,僅1例報告為陽性,其引物和探針組合:BA1針對pXO2中的一個位點,BA2針對pXO1,BA3針對炭疽桿菌染色體上的一個位點。
3.X線檢查顯示,肺部浸潤,縱隔增寬,胸腔積液等。