1.放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)(RAST) 將真菌變應(yīng)原吸附在固相支持物上，加入病人血清。如病人血清內(nèi)含有對(duì)該真菌的特異性IgE抗體，則兩相結(jié)合不能洗脫。當(dāng)再加入用同位素標(biāo)記的馬抗人IgE血清時(shí)，則三者結(jié)合成一帶有放射性的復(fù)合物，可以在γ計(jì)數(shù)器上測(cè)出具體的放射量。放射量與病人特異性IgE的量成正比?？蓳?jù)以判斷病人是否對(duì)真菌變態(tài)反應(yīng)及其過敏的程度。
2.酶聯(lián)變應(yīng)原吸附試驗(yàn)(ELISA) 其原理為先用真菌變應(yīng)原吸附在聚苯乙烯塑料板孔上，然后加入待測(cè)病人血清，再加入羊抗人酶標(biāo)IgE抗體，再加入該酶的底物，中止反應(yīng)。利用其顯色反應(yīng)，在酶標(biāo)比色儀上測(cè)定OD值，以判斷病人對(duì)真菌的敏感性及敏感程度。
3.嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn) 取病人靜脈血，經(jīng)抗凝處理后，離心層析提取嗜堿粒細(xì)胞。將病人嗜堿粒細(xì)胞移入兩個(gè)試管，分別加入真菌變應(yīng)原及空白變應(yīng)原溶媒。在37℃孵育30min后，用阿利新蘭(Alcian blue)染色，在血細(xì)胞計(jì)數(shù)器下分別計(jì)數(shù)嗜堿粒細(xì)胞數(shù)。如果與真菌變應(yīng)原共孵的樣本所計(jì)嗜堿粒細(xì)胞，少于與空白變應(yīng)原溶媒共孵的樣本30%以上，說明由于特異性抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致30%以上的嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒不能在顯微鏡下檢出，即屬陽性反應(yīng)。脫顆粒的百分比越高，顯示過敏程度越重。
4.組胺釋放試驗(yàn) 此試驗(yàn)的原理在于將病人的血細(xì)胞，經(jīng)與真菌變應(yīng)原作用后，檢測(cè)其組胺釋放的量。病人對(duì)真菌的敏感性越高，組胺釋放的量越高。由此測(cè)定病人對(duì)真菌的致敏程度。
5.真菌培養(yǎng) 真菌抗原抗體的瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)，此試驗(yàn)可對(duì)真菌過敏性肺炎、肺泡炎或過敏性支氣管肺曲菌病患者進(jìn)行特異性診斷。一般采用瓊脂雙擴(kuò)散法，將病人血清與不同濃度的真菌變應(yīng)原進(jìn)行擴(kuò)散試驗(yàn)，以觀察沉淀線的出現(xiàn)。此法在國內(nèi)對(duì)煙曲霉及青霉等抗原均已獲得陽性結(jié)果。對(duì)明確病人致病菌種是較好的客觀依據(jù)。
6.病人痰液或支氣管分泌物的真菌直接涂片檢查 從病人由深部咳出的新鮮痰液中挑取少許黏稠呈灰褐色的部分，在玻片上薄薄攤開，不等干燥，即以0.05%乳酸棉藍(lán)1滴，5min后在顯微鏡下檢查淺藍(lán)染色的真菌孢子或菌絲體。若多次檢查陽性，可作為診斷真菌變態(tài)反應(yīng)的參考性依據(jù)。
1.抗原皮內(nèi)試驗(yàn) 這是在真菌變應(yīng)性哮喘的特異性診斷中應(yīng)用最廣的常規(guī)檢測(cè)方法。一般用1∶100真菌抗原浸液，采用1ml注射器，配用4號(hào)注射針頭，在病人上臂外側(cè)皮內(nèi)輕輕注入0.01～0.02ml，15～20min觀察皮膚反應(yīng)。真菌變應(yīng)原皮膚試驗(yàn)除出現(xiàn)速發(fā)相反應(yīng)，還經(jīng)常出現(xiàn)遲發(fā)相反應(yīng)，應(yīng)予注意。
2.支氣管激發(fā)試驗(yàn) 結(jié)果準(zhǔn)確可靠，由于采用真菌變應(yīng)原制劑作吸入激發(fā)試驗(yàn)時(shí)可誘發(fā)癥狀，應(yīng)在嚴(yán)密觀察下進(jìn)行。因經(jīng)常出現(xiàn)遲發(fā)相反應(yīng)，在試驗(yàn)后的6～24h內(nèi)可再度出現(xiàn)哮喘反應(yīng)，應(yīng)予注意。詳細(xì)試驗(yàn)方法可參見氣道反應(yīng)性測(cè)定一章。
3.肺功能檢查 在臨床緩解期的部分哮喘患者中，可有閉合容量(CV)/肺活量(VC)%、閉合氣量(CC)/TLC%、中期流速(MMEF)和Vma×50%的異常。哮喘發(fā)作時(shí)，則有關(guān)呼氣流速的各項(xiàng)指標(biāo)均顯著下降，如第1秒用力呼氣容量(FEV1)、FEVl/用力肺活量 (FVC)%、MMEF均減少。由于氣體阻塞和肺泡過度膨脹，結(jié)果殘氣量(RV)、功能殘氣量(FRC)及RV/TCL比值增大。當(dāng)吸入1%異丙基腎上腺素或0.2%沙丁胺醇霧化液后，上述指標(biāo)可有改善，如果FEV1增加15%以上，則有助于支氣管哮喘的診斷。中度或重度哮喘，吸入氣體在肺內(nèi)分布不均，通氣/血流比率失調(diào)，生理死腔和生理靜-動(dòng)脈分流增加，導(dǎo)致PaO2降低，但PaCO2正?；蛏詼p低。當(dāng)嚴(yán)重哮喘或哮喘持續(xù)狀態(tài)，PaO2進(jìn)一步下降，由于呼吸肌疲勞，PaCO2可增加，并發(fā)呼吸性酸中毒，預(yù)示病情嚴(yán)重。
4.氣道反應(yīng)性測(cè)定 吸入組胺、醋甲膽堿、二氧化硫、前列腺素F2α、服用β阻滯劑、運(yùn)動(dòng)負(fù)荷等，均可誘發(fā)哮喘?？赏ㄟ^測(cè)定FEVl、最大呼氣流速、氣道阻力等檢測(cè)。在吸入激發(fā)劑后，立即并每隔15～30min復(fù)查1次。一般采用醋甲膽堿，因其反應(yīng)快，作用時(shí)間短，從0.05mg/L開始，逐漸增量，至吸入后FEV1減低超過20%，或氣道傳導(dǎo)率下降大于35%，稱為該藥的閾值。哮喘患者吸入醋甲膽堿引起氣道痙攣的敏感性較正常人高100～1000倍。激發(fā)藥物劑量-反應(yīng)曲線的斜率稱為反應(yīng)性，哮喘患者反應(yīng)性增高，吸煙者也較非吸煙者升高。誘發(fā)的氣道阻塞經(jīng)15～30min可自然消失，但在發(fā)作期的患者可引起嚴(yán)重哮喘，甚至導(dǎo)致窒息，故需嚴(yán)格掌握適應(yīng)證，并準(zhǔn)備好支氣管擴(kuò)張劑、抗休克藥物和其他搶救措施。近年來采用氣道反應(yīng)測(cè)定儀，連續(xù)記錄氣道阻力，當(dāng)其上升2倍，或持續(xù)升高2min時(shí)的藥物累積量作為敏感性指標(biāo)。吸入生理鹽水時(shí)的氣道阻力，稱為起始阻力;氣道阻力上升時(shí)吸入藥物的最小累積量，稱為反應(yīng)閾值;單位醋甲膽堿累積量的氣道阻力上升值，稱為阻力上升度;每毫升含1mg藥物，吸入1min為1個(gè)單位。反應(yīng)閾低于3個(gè)單位為敏感性增高，哮喘患者均值為1.08單位;阻力上升度大于每單位每秒0.5cmH20/L為反應(yīng)性增高，故哮喘患者的敏感性及反應(yīng)性均增高。氣道反應(yīng)性測(cè)定對(duì)隱匿型哮喘的診斷很有價(jià)值，在患者平靜呼吸的情況下可作出診斷。
