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核酸的分子雜交

基本信息

  • 專科分類： 腫瘤科
  • 檢查分類： 基因檢測（DNA）
  • 適用性別： 男女均適用
  • 是否空腹： 　空腹
  • 手術(shù)參考價： 200元
  • 科　室： 腫瘤科

核酸的分子雜交檢查簡介

核酸的分子雜交是定性或定量檢測特異RNA或DNA序列片段的有力工具。它是利用核酸分子的堿基互補原則而發(fā)展起來的。在堿性環(huán)境中加熱或加入變性劑等條件下，雙鏈DNA之間的氫鍵被破壞(變性)，雙鏈解開成兩條單鏈。這時加入異源的DNA或RNA(單鏈)并在一定離子強度和溫度下保溫(復(fù)性)，若異源DNA或RNA之間的某些區(qū)域有互補的堿基序列，則在復(fù)性時可形成雜交的核酸分子。

核酸的分子雜交檢查過程

(1)rRNA-DNA雜交：變性rRNA與變性DNA混合時，rRNA與其互補的DNA鏈形成雜交雙鏈，rRNA分子與異源DNA雜交時，也能在其同源區(qū)形成互補雙鏈，這種雜交雙鏈的穩(wěn)定性與其同源性成正相關(guān)，適于細菌屬及屬上水平的分類研究?，F(xiàn)最常用的是硝酸纖維膜結(jié)合法。

(2)核酸探針技術(shù)：

應(yīng)用核酸探針技術(shù)檢測病原微生物核酸是臨床診斷學(xué)的重大發(fā)展，其原理是用帶有酶、化學(xué)熒光物、放射性核素或生物素標記的已知序列特定DNA片段(稱為探針)，在一定條件下，按堿基互補原則探針與待測標本中的核酸雜交，通過對雜交信號的檢測，從而鑒定標本中有無相應(yīng)的病原微生物基因及其分子大小。常用核酸探針技術(shù)有固相雜交(斑點雜交、原位雜交、Southern印跡、Northern印跡等。)和液相雜交技術(shù)。

核酸探針適用于直接檢出臨床標本中的病原微生物，不受非病原微生物的影響，因此對某些尚不能分離培養(yǎng)或很難分離培養(yǎng)的微生物的檢測具有重要的意義。隨著探針標記的不斷改進，檢測試劑盒商品化，操作更簡便易行。

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