眼弓形體病檢查
一、檢查：
弓形體感染的診斷主要根據(jù)典型的眼部及全身臨床表現(xiàn)、病原體直接觀察、特異性抗體檢測和聚合酶鏈反應(yīng)等檢查。
1.病原學(xué)檢查：
1)涂片染色法：
在疾病的急性期，血液、腦脊液、尿和乳汁中均可有滋養(yǎng)體存在。將這些標(biāo)本離心，沉淀物作涂片，可通過姬氏染色在顯微鏡下觀察。慢性期可通過活組織檢查，于蘇木精-伊紅染色或銀染色后進(jìn)行觀察。
2)動物接種分離或細(xì)胞培養(yǎng)：
取患者的樣本接種于敏感的動物腹腔內(nèi)，一周后取腹腔液在顯微鏡下進(jìn)行檢查，或接種于離體培養(yǎng)的單層有核細(xì)胞后進(jìn)行觀察。
2.血清學(xué)方法：
在多數(shù)情況下，弓形體病原學(xué)檢查比較困難，且陽性率不高，因此，多借助于血清學(xué)檢查。但是單純的血清學(xué)方法不能確定診斷，特別是對懷疑眼弓形體病的患者，血清抗弓形體抗體檢測僅能作為診斷參考，更為重要的是應(yīng)進(jìn)行眼內(nèi)液弓形體抗體的檢測。
常用的血清學(xué)檢查方法有Sabin-Feldman染料試驗、補(bǔ)體結(jié)合試驗、血細(xì)胞凝集反應(yīng)、免疫熒光素標(biāo)記抗體試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗、免疫印跡試驗和免疫吸附凝集試驗。
1)Sabin-Feldman染料試驗：
此是檢測抗弓形體抗體的準(zhǔn)確試驗方法，其他檢測方法往往以此方法作為校正標(biāo)準(zhǔn)。其原理為將患者的血清或其他體液與補(bǔ)體和活的弓形體一起培養(yǎng)，加入染料以定量抗體。此試驗可以檢測到早期的感染，對急性期和慢性期感染均有良好的敏感性和特異性。但由于此種方法使用活的有毒力的弓形體，鑒于安全考慮，許多實驗室已不用此種檢測方法。
2)補(bǔ)體結(jié)合試驗：
在循環(huán)抗體有較高水平時，補(bǔ)體結(jié)合試驗有較高的敏感性，并對觀察抗體水平的升高有幫助，主要用于獲得性弓形體感染的診斷。但在感染的早期和慢性期，此種試驗的診斷價值有限。因此此種檢測方法應(yīng)與其他方法聯(lián)合應(yīng)用。
3)血細(xì)胞凝集反應(yīng)試驗：
血細(xì)胞凝集反應(yīng)試驗對急性期和慢性期均有較高的敏感性和特異性，但是在不同實驗室此種試驗有很大的變異，對早期感染和先天性感染的診斷價值不大，因此應(yīng)與其他試驗聯(lián)合應(yīng)用。
4)免疫熒光素標(biāo)記抗體試驗：
免疫熒光素標(biāo)記抗體試驗簡單易行，可以確定早期抗體水平升高，可以對IgM和IgG定量，是一種常用的檢測方法。但在交叉反應(yīng)抗體存在時，它不能得出明確的結(jié)果，如類風(fēng)濕因子可以造成假陽性IgM結(jié)果，抗核抗體也可造成IgM、IgG假陽性結(jié)果，對巨細(xì)胞病毒、EB病毒、甲型肝炎病毒、二期梅毒等的交叉反應(yīng)也可造成IgM假陽性結(jié)果。
5)酶聯(lián)免疫吸附試驗：
此種試驗方法有很高的敏感性和特異性，是目前最常用的檢測方法。雙夾心法在檢測IgM時優(yōu)于免疫熒光素標(biāo)記抗體試驗，并且類風(fēng)濕因子、抗核抗體等也不影響檢測結(jié)果。其敏感性很高，可以在感染后數(shù)月內(nèi)測到IgM抗體，并且用其可以觀察感染后IgM的變化。
6)免疫吸附凝集試驗：
此種檢測方法可以同時檢測抗弓形體IgA和IgM抗體，有很高的敏感性和特異性。IgA的消失通?？煊贗gM。在慢性期IgA通常不存在，二者同時存在往往提示有急性感染，因此對孕期原發(fā)性感染的診斷有重要價值。
7)免疫印跡試驗：
免疫印跡試驗有很高的敏感性，對先天性弓形體感染的診斷有重要價值。
3.聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)：
聚合酶鏈反應(yīng)是體外大量擴(kuò)增特異DNA序列(或基因)的一種方法。其過程與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制基本相似，此種反應(yīng)需要一個目的DNA序列，一對引物和4種三磷酸脫氧核糖核苷酸和耐熱的DNA多聚酶。
羊水PCR檢測對宮內(nèi)弓形體感染有幫助。對房水和玻璃體進(jìn)行PCR檢測，可用于眼弓形體病的診斷，腦脊液檢測可用于弓形體顱內(nèi)感染的診斷。
4.其他實驗室檢查：
血常規(guī)檢查對先天性感染有一定的幫助，患者通常有貧血、血小板減少、白細(xì)胞減少或增多、嗜酸性粒細(xì)胞增多。獲得性感染也可出現(xiàn)中等度的嗜酸性粒細(xì)胞增多，并可出現(xiàn)轉(zhuǎn)氨酶升高。顱內(nèi)弓形體感染者的腦脊液壓力升高、顏色變黃、淋巴細(xì)胞增多和蛋白濃度升高。
1）熒光素眼底血管造影檢查(FFA)和吲哚青綠血管造影檢查：
眼弓形體病的活動性病灶，熒光素眼底血管造影早期顯示病灶中央弱熒光，之后出現(xiàn)熒光素滲漏。瘢痕病灶因視網(wǎng)膜色素上皮增殖可出現(xiàn)早期弱熒光，或因視網(wǎng)膜色素上皮萎縮而表現(xiàn)為透見熒光。不規(guī)則的視網(wǎng)膜色素上皮萎縮和增殖則導(dǎo)致斑駁狀外觀，晚期則出現(xiàn)病灶邊緣染色。神經(jīng)視網(wǎng)膜炎或神經(jīng)炎患者通常出現(xiàn)視盤邊緣強(qiáng)熒光。伴有視網(wǎng)膜血管炎的患者可見血管滲漏和后期血管壁染色，還可發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜內(nèi)動靜脈短路、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜短路、黃斑囊樣水腫、脈絡(luò)膜新生血管膜等病變。吲哚青綠血管造影可顯示活動性病灶部位早期出現(xiàn)弱熒光或強(qiáng)熒光，晚期表現(xiàn)為強(qiáng)熒光。還可發(fā)現(xiàn)檢眼鏡和熒光素眼底血管造影不能發(fā)現(xiàn)的早期復(fù)發(fā)性病變。
2）CT和磁共振檢查：
可發(fā)現(xiàn)腦內(nèi)鈣化和腦病變，此對顱內(nèi)弓形體感染的診斷有重要幫助。
