由于近年來艾滋病的蔓延，過去常用的被動(dòng)轉(zhuǎn)移試驗(yàn)現(xiàn)已很少在臨床上使用，目前體外特異性試驗(yàn)主要采用血清學(xué)或細(xì)胞學(xué)免疫方法進(jìn)行檢測(cè)，其最大優(yōu)點(diǎn)是安全，但多數(shù)體外的免疫學(xué)檢測(cè)需要特殊的精密設(shè)備，操作亦較復(fù)雜，敏感性也不如體內(nèi)試驗(yàn)，故目前體外特異性試驗(yàn)主要用于臨床科研，主要有以下幾種方法：
1.血清學(xué)試驗(yàn) 血清免疫球蛋白G主要測(cè)定病人血清中針對(duì)致敏花粉的特異性IgG等抗體。常用檢查方法有放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)(RAST)、放射免疫吸附試驗(yàn)(RIST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)和點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)等。
血清免疫球蛋白E主要測(cè)定病人血清中針對(duì)致敏花粉的特異性IgE等抗體。常用檢查方法有放射變應(yīng)原吸附試驗(yàn)(RAST)、放射免疫吸附試驗(yàn)(RIST)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)和點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)等。
2.細(xì)胞免疫學(xué)檢查 主要檢測(cè)手段是檢測(cè)針對(duì)致敏花粉的特異性T淋巴細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞脫顆粒試驗(yàn)(basophillc degranulation test)等。
根據(jù)花粉變應(yīng)性哮喘的臨床特征，結(jié)合當(dāng)?shù)氐拇髿庵兄旅艋ǚ埏h散的時(shí)間，診斷并不困難，但要明確致敏花粉的種類則需要借助試驗(yàn)室的特異性檢查。特異性檢查包括體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)兩大類，兩者各有利弊。通常體內(nèi)試驗(yàn)敏感性高、操作方便、簡(jiǎn)單易行，但易受患者用藥的影響和可能引起過敏反應(yīng)。體外試驗(yàn)敏感性稍差、操作復(fù)雜費(fèi)時(shí)且需要特殊設(shè)備，但由于是體外試驗(yàn)，故絕對(duì)安全。目前國(guó)內(nèi)臨床上以體內(nèi)試驗(yàn)應(yīng)用較為廣泛，而體外試驗(yàn)多用于進(jìn)行臨床科研。
1.皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn) 特異性皮膚試驗(yàn)是英國(guó)醫(yī)生Blackley于1867年首先應(yīng)用于花粉癥的診斷的，其在臨床使用有130余年的歷史，仍是目前臨床廣泛應(yīng)用的特異性檢測(cè)方法。通常將花粉變應(yīng)原浸液以1∶1000(w/v)的濃度進(jìn)行稀釋后進(jìn)行皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)(Prick test)或皮內(nèi)試驗(yàn)(Intradermal test)。皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)的具體方法是將稀釋的花粉浸液滴于皮膚上，然后用點(diǎn)刺針刺入附有花粉浸液的皮膚上，將表面輕輕挑破即可。皮內(nèi)方法是借助1ml注射器用4號(hào)針頭將稀釋的花粉浸液0.01～0.02ml注入皮內(nèi)即可。2種方法均在試驗(yàn)后15～20min根據(jù)紅潤(rùn)反應(yīng)和皮丘大小來判斷結(jié)果。目前國(guó)外以皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)應(yīng)用較為普遍，國(guó)內(nèi)目前則以皮內(nèi)試驗(yàn)法為主。兩種方法均方便易行，既適合于臨床上確定花粉過敏性哮喘病人對(duì)花粉過敏的種類，也適合于該病的流行病學(xué)調(diào)查。目前臨床上多根據(jù)季節(jié)將花粉進(jìn)行分組，采用多價(jià)花粉浸液來進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，如早春花粉、晚春花粉、夏季花粉和秋季花粉，每季花粉由3～5種同季的主要致敏花粉組成，但這種根據(jù)季節(jié)分組的花粉往往難以具體確定致敏花粉的種類，故準(zhǔn)確性較差，有時(shí)可出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性，如果遇到上述可疑情況時(shí)可采用單一花粉浸液進(jìn)行皮膚試驗(yàn)以明確診斷。
2.支氣管激發(fā)試驗(yàn)(bronchial provocative test) 這是一種模擬花粉變應(yīng)性哮喘發(fā)作的試驗(yàn)方法，所得結(jié)果較為可靠，當(dāng)特異性皮膚試驗(yàn)的結(jié)果難以判定時(shí)，該試驗(yàn)方法可以取得較為可靠的結(jié)果，通常根據(jù)病人吸入花粉變應(yīng)原浸液的濃度或數(shù)量后的肺通氣指標(biāo)的變化來判斷結(jié)果。該方法可信性強(qiáng)、重復(fù)性好，可準(zhǔn)確反映氣道對(duì)某種花粉的反應(yīng)性和敏感性。該方法的缺點(diǎn)是如果吸入花粉浸液的濃度過高或劑量過大可能誘發(fā)哮喘發(fā)作。
3.鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)(nasal mucous provocative test) 由于鼻黏膜與支氣管黏膜同屬呼吸道黏膜上皮，該試驗(yàn)的結(jié)果通常也可較準(zhǔn)確地反映支氣管的對(duì)花粉的敏感程度。與支氣管激發(fā)試驗(yàn)相比，既安全又簡(jiǎn)便，為臨床常用的試驗(yàn)方法之一。具體方法是將浸有花粉浸液原液的標(biāo)準(zhǔn)大小濾紙放于一側(cè)鼻黏膜上，也可采用定量噴霧器噴入一側(cè)鼻腔內(nèi)定量的花粉浸液，另一側(cè)鼻腔作為空白對(duì)照。在15min左右觀察結(jié)果，病人出現(xiàn)鼻癢、噴嚏、流清涕、鼻塞、鼻黏膜蒼白、水腫等癥狀體征時(shí)判定為陽(yáng)性結(jié)果，并可根據(jù)噴嚏的多少、清涕的數(shù)量、鼻通氣程度、有無喘息癥狀或全身癥狀判定陽(yáng)性結(jié)果程度，通常局部反應(yīng)可分為 ， ， ，伴哮喘癥狀或全身反應(yīng)時(shí)可判為 。如果15min無反應(yīng)，還應(yīng)在4～7h觀察有無遲發(fā)性反應(yīng)，如果仍無反應(yīng)即可判定為陰性結(jié)果。為了避免判斷錯(cuò)誤，通常應(yīng)先進(jìn)行空白對(duì)照試驗(yàn)，如果10min沒有反應(yīng)，則可在另一側(cè)鼻腔進(jìn)行花粉激發(fā)試驗(yàn)，如果空白對(duì)照試驗(yàn)陽(yáng)性，可以改用其他試驗(yàn)方法。
4.眼結(jié)膜激發(fā)試驗(yàn)(conjunctival test) 將花粉浸液稀釋后滴在眼結(jié)膜上，觀察有無眼癢，流淚和充血等陽(yáng)性表現(xiàn)。眼結(jié)膜激發(fā)試驗(yàn)結(jié)果可信度雖然比鼻黏膜激發(fā)試驗(yàn)稍差，但比特異性皮試可靠的多。眼結(jié)膜試驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)是安全性較大，發(fā)生嚴(yán)重過敏反應(yīng)時(shí)可通過沖洗將變應(yīng)原清除。
