雙黃連組成成分 雙黃連制劑的研究進(jìn)展(2)

2．5雙黃連粉針的研究

南京市兒童醫(yī)院易璜對(duì)雙黃連粉針與氣霧劑的體外抑病毒作用進(jìn)行了對(duì)比研究。將雙黃連粉針注射劑、雙黃連氣霧劑及病毒靈3種藥物以0.1g/ml為原液，按2-n×10-1(n為1-14)倍比稀釋，分別加入已長(zhǎng)成單層Hep-2細(xì)胞的96孔培養(yǎng)板中，放入37℃二氧化碳溫箱過夜，觀察各濃度中藥對(duì)細(xì)胞的毒性作用，從不出現(xiàn)細(xì)胞毒的藥物濃度開始，依次向下取6個(gè)不同稀釋濃度的中藥進(jìn)行抑病毒試驗(yàn)。合胞病毒(KSV)、柯薩奇B組3型病毒(CB3)及5型病毒(CB5)、腺病毒3型(A3)7型(A7)用中和試驗(yàn)，分別以100TCID50的病毒和各組不同濃度的中藥等量混合，37℃作用1.5小時(shí)，接種已長(zhǎng)成單層Hep-2細(xì)胞的培養(yǎng)板，放二氧化碳溫箱中培養(yǎng),待病毒對(duì)照細(xì)胞出現(xiàn)病變75-100%時(shí)判定結(jié)果。流感病毒(F)、副流感病毒(P)采用血液凝集抑制試驗(yàn)，用4uF、P與各組不同濃度中藥等量混合，37℃作用1.5小時(shí)后,用常規(guī)法做血液凝集抑制試驗(yàn)。結(jié)果:雙黃連氣霧劑對(duì)KSV、A7、F、P的抑制作用優(yōu)于粉針劑;雙黃連粉針劑對(duì)CB3、CB5的抑制作用優(yōu)于氣霧劑;兩藥的抑病毒作用明顯優(yōu)于對(duì)照藥病毒靈。中國疾病防治控制中心(CDC)病毒病預(yù)防控制所的報(bào)告的結(jié)論認(rèn)為:"以上試驗(yàn)結(jié)果表明由注射用雙黃連，在HELA細(xì)胞培養(yǎng)內(nèi)，采用病毒CPE法，試驗(yàn)結(jié)果表明注射用雙黃連藥物具有抗冠狀病毒的作用。"姜鳳春等報(bào)道取雙黃連粉針劑0.6克，用0.9%生理鹽水8毫升溶解，用溶解好的雙黃連溶液清洗創(chuàng)面后，噴涂雙黃連粉劑，每日一次，治療褥瘡有良好效果。雙黃連液在肉芽創(chuàng)面上可誘導(dǎo)皮島形成，抑制成纖維細(xì)胞核分離和增殖，清除膿汁，調(diào)整和改善創(chuàng)面微循環(huán)，促進(jìn)傷口愈合，提高治愈率。陳永宏等報(bào)道用雙黃連粉針治療嬰幼兒秋冬季腹瀉，治療組顯效85例(70.8％)，有效30例(25.0%)，無效5例(4.2％)，總有效率為95.8％。對(duì)照組顯效9例(30.0%)，有效6例(20.0%)，無效15例(52.0%)，總有效率為50.0%，2組比較有極顯著性差異(P&0.001)。發(fā)病3日內(nèi)臨床診斷輪狀病毒腸炎82例，治療組總有效率為97.6％;對(duì)照組12例，總有效率為41.7％。本研究觀察150例中經(jīng)病原學(xué)檢測(cè)確診為輪狀病毒腸炎為77例，治療組64例中顯效44例(68.8％)，有效16例(25.0％)，總有效率為93.8％;對(duì)照組13例中顯效3例(23.1％)，有效1例(7.7％)，總有效率為30.8%，2組比較有極顯著性差異(P&0.001)。王俊峰等報(bào)道采用超聲霧化吸入雙黃連粉針治療急性咽炎和扁姨逖茲〉媒下飭菩В?span>76例患者中顯效45例(59.2%)，有效29例(38.2％)，無效2例(2.6％，主要為急性化膿性扁桃體炎)。總有效率為97.4％。侯國平報(bào)道(1986)藥理研究證明，雙黃連可增強(qiáng)機(jī)體產(chǎn)生α干擾素能力，顯著增強(qiáng)細(xì)胞免疫和體液免疫作用，對(duì)多種病毒和細(xì)菌都有抑制作用，尤其能中和細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素，故同時(shí)具有抗感染及免疫調(diào)節(jié)雙重作用，可謂"標(biāo)本兼治"。目前臨床多采用雙黃連粉針靜脈給藥，并配合其他抗生素治療呼吸和泌尿系統(tǒng)感染，療效較好。但也時(shí)有報(bào)道發(fā)生過敏性藥疹、胃腸不適、惡心嘔吐、寒顫、發(fā)熱和鞏膜黃染等不良反應(yīng)，而超聲霧化吸入雙黃連粉針可使病灶局部藥物濃度高、吸收快，尤其是深而慢的呼吸以及吸氣末屏氣都有利于霧粒沉積，加強(qiáng)抗炎、止咳、祛痰、退熱的作用。

鄭一寧等(2001)建立了雙黃連粉針劑中黃芩苷含量測(cè)定的高效毛細(xì)管電泳電導(dǎo)法;以未涂層融硅毛細(xì)管(75μm×50cm)為分離柱,Tris-H3BO3為電泳介質(zhì)(15mmo1/LTris,1.5mmol/LH3BO3),在18kV、pH85的堿性環(huán)境下,柱端電導(dǎo)檢測(cè)雙黃連粉針劑中的黃芩苷含量;重點(diǎn)探討了緩沖溶液的種類、濃度、分離電壓、進(jìn)樣時(shí)間對(duì)檢測(cè)的影響;該法的線性范圍為10～720mg/L,檢出限為2.5mg/L;結(jié)果表明該法簡(jiǎn)便、快速、結(jié)果準(zhǔn)確,適用于含黃芩苷的制劑含量的測(cè)定中國獸藥114網(wǎng)。雙黃連粉針配伍研究表明，維生素C和雙黃連粉針配伍，結(jié)果顯示出外觀無明顯變化外，其余PH值、維生素C含量、雙黃連有效成分黃芩甙、綠原酸、紫外光譜和薄層層析結(jié)果均明顯改變，提示有理化配伍禁忌，可信度較高;應(yīng)定為配伍禁忌為好。青霉素G與雙黃連有7篇文獻(xiàn)從理化配伍角度研究，認(rèn)為可配伍，但《中國藥師》2001，4(2):138從6名青霉素皮試強(qiáng)陽性者藥理實(shí)驗(yàn)角度研究，結(jié)論雙黃連、復(fù)方黃連素不能和青霉素G配伍，否則增加青霉素G弱陽性或假陰性患者發(fā)生過敏反應(yīng)的危險(xiǎn)性，可間隔一定時(shí)間交替應(yīng)用、更換品種或配物液皮試陰性后再用，也不主張同時(shí)在兩個(gè)不同用藥部位分別給藥。氨芐青霉素和雙黃連針配伍存在不同結(jié)論:(+)作者實(shí)驗(yàn)濃度為100ml生理鹽水+雙黃連針600mg+氨芐西林鈉1.5g，結(jié)果為溶液顏色即可變深，二波張?zhí)幬罩到档?，PH值下降，認(rèn)為不宜配伍(《中國醫(yī)院藥學(xué)雜志》，1999，19(11):701;《中國藥業(yè)》1999，8(2):23)。(-)作者按雙黃連針每日劑量3g(為標(biāo)明配制濃度)和氨芐青霉素2mg/500ml生理鹽水(可能印刷錯(cuò)誤，2g誤印成2mg)體內(nèi)外考察結(jié)論為8小時(shí)物理化禁忌現(xiàn)象，藥液穩(wěn)定，可以配伍(《雙黃連粉針第五屆臨床學(xué)術(shù)討論會(huì)論文匯編》12~19頁，1996年8月8日)。但其理化實(shí)驗(yàn)過程報(bào)告欠詳，數(shù)據(jù)令人難以置信。雙方結(jié)論有待進(jìn)一步驗(yàn)證。頭孢噻肟:雙黃連不影響頭孢噻肟的穩(wěn)定性，但配伍后不溶性微粒增多，1995年版《中國藥典》雖對(duì)粉針劑未作限制標(biāo)準(zhǔn)，但建議分開使用。(《廣東藥學(xué)》，2000，(4):34)作者在經(jīng)外觀、PH值、紫外吸收曲線、吸收度等考察后均無顯著差異，結(jié)論為可配伍，和上相比，僅在考察項(xiàng)目上存在差異，減少微粒一項(xiàng)。(《中國醫(yī)院藥學(xué)雜志》，1999，19(11):701)雖做微?？疾?，不隨時(shí)間延長(zhǎng)而增多，總體上微粒增多，但結(jié)論時(shí)未作評(píng)估。小諾霉素:(《全國醫(yī)院藥學(xué)會(huì)議論文集》246頁，2000年牡丹江)考察0-5小時(shí)無理化配伍禁忌。(《健康報(bào)》2000，3，10)周德明臨床實(shí)踐配伍后出現(xiàn)混濁?？赡艽嬖谄渌蛩兀孕柽M(jìn)一步考察，以不配伍為好。地塞米松配伍雙黃連針:(-)者，無理化禁忌;(+)者報(bào)告地塞米松影響雙黃連針治療小兒病毒性肺炎療效，使病程延長(zhǎng)(《中國藥業(yè)》，2001，11(2):60;《綜合臨床醫(yī)學(xué)》1997，13(2):169)。5%~10%葡萄糖、葡萄糖氯化鈉:(《中國醫(yī)院藥學(xué)雜志》，1997，17(7):307)考察配伍后黃芩甙、綠原酸、連翹甙等含水量，認(rèn)為可配伍，但不宜與含鉀復(fù)方葡萄糖配伍。(《中國藥學(xué)雜志》增刊，1995，30:113)提出配伍后PH值有一定改變，微粒增多雙黃連穩(wěn)定性最差，宜現(xiàn)配現(xiàn)用。(《中國藥房》，2001，12(1):55)一綜述文章說，配伍后微粒增多。李雪苓報(bào)道(1999)雙黃連粉針與黃芪注射液聯(lián)合應(yīng)用治療病毒性心肌炎36例療效顯著，治療組(雙黃連粉針＋黃芪多糖):顯效24例(66.7％)，有效7例，無效5例，總有效率86.1％;對(duì)照組(能量合劑):顯效11例(36.7％)，有效8例，無效11例，總有效率63.3％。2組比較，治療組顯效率明顯高于對(duì)照組(χ2=5.91，P＜0.05＝，治療組總有效率明顯高于對(duì)照組(χ2=4.62，P＜0.05)，均有顯著性差異。

2．5雙黃連注射液的研究

雙黃連注射液的主要成分為金銀花、黃芩和連翹，具有較強(qiáng)的抗菌和抗病毒作用，臨床主要用于急性上呼吸道感染、皰疹性咽峽炎、急性喉炎、急性扁桃體炎、急性支氣管炎和肺炎的治療。用藥方法為加入葡萄糖溶液中靜滴。曹春林等研發(fā)出的痰熱清注射液，是以雙黃連注射液為基礎(chǔ)，針對(duì)原注射液在治療急性熱病中存在"病重藥輕"之不足，也為克服原注射液制備工藝粗放、不良反應(yīng)較嚴(yán)重等缺欠，等于雙黃連注射液的二次開發(fā)。經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)，現(xiàn)已作完三期臨床試驗(yàn)，治療風(fēng)溫肺熱病痰熱阻肺證(急性肺炎與急性支氣管炎)680例，結(jié)果表明痰熱清注射液的療效明顯優(yōu)于雙黃連注射液，且尚未發(fā)現(xiàn)有不良反應(yīng)。王敏報(bào)道(2004)治療組使用雙黃連注射液，按1mg/(kg·d)靜脈滴注。對(duì)照組采用病毒唑10～15mg/(kg·d)靜脈滴注。結(jié)果治療組在退熱時(shí)間、咳喘恢復(fù)時(shí)間、肺部羅音消失時(shí)間、血象恢復(fù)正常時(shí)間、X線表現(xiàn)恢復(fù)正常時(shí)間及平均治愈天數(shù)等方面均明顯優(yōu)于對(duì)照組(P&0.05)。蔣達(dá)華報(bào)道(2004)雙黃連注射液治療豬流感效果好。黃啟華(2000)采用鹽酸溶液沉淀分離，采用紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液中黃芩甙含量。結(jié)果顯示平均含量為6～9mg/ml。RSD為0.34%;與HPLC色譜相，結(jié)果相一致。表明紫外分光光度法測(cè)定雙黃連注射液中黃芩甙的含量方法簡(jiǎn)單，靈敏度高，重現(xiàn)性好，結(jié)果穩(wěn)定，可作為質(zhì)量檢驗(yàn)的一個(gè)快速定量方法中國獸藥114網(wǎng)。

杜玉梅報(bào)道雙黃連注射液臨床應(yīng)用療效好，特別是對(duì)病毒感染，效果顯著，毒副作用小，在臨床用藥中出現(xiàn)不同癥狀的過敏反應(yīng)，經(jīng)觀察，均未發(fā)現(xiàn)其它并發(fā)癥的出現(xiàn)，說明毒性作用小，預(yù)后好，亦無年齡、性別差異。雙黃連注射液出現(xiàn)的5例過敏反應(yīng)，過敏癥狀出現(xiàn)較快，一般在給藥半小時(shí)左右，作者所見2例胃腸道反應(yīng)明顯者，在停藥后癥狀即可消失，皮膚、呼吸道反應(yīng)者均在停藥后1-3天癥狀逐漸消失。黃友芳報(bào)道在臨床使用中雙黃連粉針劑靜脈滴注導(dǎo)致過敏性休克、藥疹及胃腸道反應(yīng)，但此類致敏反應(yīng)的發(fā)生可能與個(gè)體差異及過敏性體質(zhì)有關(guān)。雙黃連粉針劑的主要成分之一是雙花中所含有的綠原酸，它既具有抗菌抗病毒作用，又具有致敏原作用，可引起變態(tài)反應(yīng)。張氏等報(bào)道，雙黃連注射液可致急性再生障礙性貧血。程氏等報(bào)道，幼兒以雙黃連注射劑1g治療，可致萊爾綜合征。李氏等報(bào)道雙黃連粉針劑口腔潰瘍。李氏報(bào)道，雙黃連注射液40mL靜滴可致外陰瘙癢不適。近年來臨床應(yīng)用雙黃連注射液較為廣泛，其不良反應(yīng)的相關(guān)報(bào)道亦逐年增加，臨床所見不良反應(yīng)類型包括皮疹、腹瀉、腹痛、嘔吐以及皮膚瘙癢、頭暈、胸悶等，偶爾發(fā)生過敏性休克。據(jù)資料統(tǒng)計(jì)表明不良反應(yīng)中以皮疹最為常見，多數(shù)發(fā)生在頭面部，呈單一或多個(gè)斑丘疹，少數(shù)為全身皮膚風(fēng)團(tuán)，極少數(shù)為紅色斑丘疹。其次為腹痛、腹瀉，但相對(duì)皮疹來說要少見得多。說明雙黃連注射液的不良反應(yīng)主要是與藥物分子量大而易致過敏反應(yīng)有關(guān)，但具體機(jī)制尚不清楚。

３、國內(nèi)雙黃連制劑生產(chǎn)情況

目前，雙黃連的制劑已經(jīng)有口服液、注射液、粉針、片劑、含片、氣霧劑、顆粒劑、滴眼液等多種劑型在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域被廣泛使用。在動(dòng)物藥品領(lǐng)域，主要是雙黃連口服液和注射液兩種劑型被生產(chǎn)和應(yīng)用。由此可見，雙黃連注射液、口服液等制劑的成功開發(fā)和應(yīng)用，對(duì)豐富動(dòng)物藥品品種，有效防治動(dòng)物疾病具有十分重要的意義和前景。